【摘 要】
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目的:构建针对人Livin基因的短发夹状小干扰RNA(shRNA)表达载体,并观察该载体对Livin基因表达的沉默效应。方法:设计并合成4个Livin靶向的发夹状siRNA靶序列,退火后分别连接人pGCL-
【机 构】
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中国医科大学附属盛京医院妇产科,中国医科大学附属盛京医院中心实验室,中国医科大学细胞生物学教研室
【基金项目】
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辽宁省教育厅高等学校科研基金项目(编号:05L475)
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目的:构建针对人Livin基因的短发夹状小干扰RNA(shRNA)表达载体,并观察该载体对Livin基因表达的沉默效应。方法:设计并合成4个Livin靶向的发夹状siRNA靶序列,退火后分别连接人pGCL-GFP慢病毒表达载体,转化,扩增后测序。以含有Livin基因的质粒为模板,扩增Livin基因cDNA序列的特异性片段,连接,克隆人真核表达载体pdsRED2-N1-3FLAG。将构建好的Livin基因过表达克隆质粒和不同靶点的RNAi表达载体质粒,经lipfectamine2000包裹,共转染人人293
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