【摘 要】
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构建了枯草芽孢杆菌CH2菌株(Bacillus subtilis CH2)壳聚糖酶基因的真核表达载体pPIC9K-CH2-Cns,在毕赤酵母GS115(Pichia pastoris)中进行重组表达,获得了有生物学活性的重组
【机 构】
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中国水产科学研究院黄海水产研究所,上海海洋大学水产与生命学院,青岛大学生命科学学院
【基金项目】
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中国水产科学研究院基本科研业务费资助项目(2014A03XK01,2014C04XK01),青岛大学引进人才科研启动费资助项目.
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构建了枯草芽孢杆菌CH2菌株(Bacillus subtilis CH2)壳聚糖酶基因的真核表达载体pPIC9K-CH2-Cns,在毕赤酵母GS115(Pichia pastoris)中进行重组表达,获得了有生物学活性的重组壳聚糖酶,对重组壳聚糖酶的酶学特性及酶解产物进行了分析。结果显示,重组壳聚糖酶的分子量为29kD,粗酶的比酶活达到133.60U/mg,纯化后重组蛋白的比酶活为338.08U/mg;该酶的最适作用温度为50℃,最适pH为4.5,酶动力学常数Vmax=24.39(μmol/mg)
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