【摘 要】
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本研究通过分析重楼法定基原(七叶一枝花和云南重楼)与其同属近缘种ITS序列的差异设计了3对特异性引物。利用多重聚合酶链反应(PCR)原理建立了一套能快速、准确鉴别重楼法定
【机 构】
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成都中医药大学药学院,中国科学院成都生物研究所天然产物中心,成都中医药大学民族医药学院
【基金项目】
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国家自然科学基金(81573545、81001606);霍英东教育基金(121045);四川省科技厅应用基础研究项目(2017JY0136);四川省崇州市现代农业创新驱动试点区(2015-CX00-00004-ZF)
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本研究通过分析重楼法定基原(七叶一枝花和云南重楼)与其同属近缘种ITS序列的差异设计了3对特异性引物。利用多重聚合酶链反应(PCR)原理建立了一套能快速、准确鉴别重楼法定基原与其同属近缘种的方法。最终,七叶一枝花样本可扩增出片段大小为210 bp的特异性片段,云南重楼种下的两类基因型(YN-I、YN-II)样本可分别扩增出248 bp和149 bp的特异性片段。在法定基原得到阳性鉴定的同时,其他同属近缘种无任何片段,避免了干扰。该方法首次实现了,在一套多重PCR反应体系中同时鉴别重楼药典法定基原与其同属近缘种,对于提升中药重楼的质量控制技术水平具有重要意义。
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