【摘 要】
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为了检测雷公藤甲素皮肤给药后皮肤和关节内的药物浓度,该研究拟建立雷公藤甲素HPLC-MS/MS检测法和皮肤、关节在体微透析方法。采用三重四极杆(AB QTRAP4500)和Phenomenex-C1
【机 构】
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江西中医药大学现代中药制剂教育部重点实验室; 江西省中药提取物及制剂工程技术研究中心;
【基金项目】
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国家自然科学基金2014年度地区基金项目(81460607);2015年江西中医药大学校级研究生创新专项(JZYC15S04)
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为了检测雷公藤甲素皮肤给药后皮肤和关节内的药物浓度,该研究拟建立雷公藤甲素HPLC-MS/MS检测法和皮肤、关节在体微透析方法。采用三重四极杆(AB QTRAP4500)和Phenomenex-C18(4. 6 mm×150 mm,5μm,luna)色谱柱,流动相乙腈-0. 1%甲酸(65∶35),流速0. 7 m L·min-1,采用ESI源正离子多反应监测(MRM)扫描,雷公藤甲素监测离子对m/z 361. 1→145. 0,建立HPLC-MS/MS检测法,并对该方法进行考察。通过增量法和减量法,考察灌流液[Ringer’s,PBS(p H 7. 4),30%乙醇生理盐水],流速,浓度的不同对探针回收率的影响及回收率和损失率的关系。用在体微透析减量法,考察10 h内探针体内回收率的稳定性。结果显示,HPLC-MS/MS检测法的方法学考察结果均符合生物样品要求。灌流液选回收率最高的30%乙醇生理盐水; 0. 5～2. 5μL·min-1内,探针的回收率随流速增加而下降,综合考虑数据的时效性和检测的准确性,将灌流速度均确定为1μL·min-1,采样间隔0. 5 h; 10～200μg·L-1内皮肤、关节探针的回收率和损失率近似相等且均不受浓度的影响,故可用探针的损失率代替探针的回收率;探针在大鼠体内10 h内的损失率维持相对稳定。该研究建立的HPLC-MS/MS检测法和雷公藤甲素皮肤和关节微透析方法可用于雷公藤甲素皮肤给药后皮肤和关节内药代动力学研究。
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