HBV全基因组逆转录病毒载体的构建及鉴定

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目的构建HBV全基因组逆转录病毒载体,并进行酶切鉴定和测序。方法用合适的引物,通过PCR方法扩增pBlueScript sk(-)-HBV载体上的HBV全基因组,分别用HindⅢ和SalⅠ进行PCR产物和pLEGFP-N1载体的双酶切,用连接酶将HBV DNA和载体进行连接,转化连接产物后,进行质粒提取、酶切和测序鉴定。结果PCR产物凝胶电泳可见3.2kb条带。pLEGFP-N1-HBV重组质粒酶切结果电泳后,可看见6.9kb和3.2kb的条带,测序结果表明重组质粒含有HBV全基因组。结论成功构建了HBV
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