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目的
测定云南省狂犬病病毒糖蛋白全编码区基因序列,阐明它们的分子生物学特征。
方法用直接免疫荧光法进行病毒抗原检测,对阳性标本提取病毒RNA,用逆转录聚合酶链式反应对病毒糖蛋白基因进行全序扩增,并对目的基因核苷酸和氨基酸进行同源性和进化树分析以及氨基酸位点分析。
结果在云南省获得18株狂犬病病毒糖蛋白全编码区基因序列,它们的核苷酸序列和推导氨基酸序列同源性分别为98.2%~99.9%和97.3%~99.8%,与国内外参考株核苷酸序列和推导氨基酸序列的同源性分别为85.7%~99.9%和93.1%~99.8%。进化分析表明,云南流行株分别与我国南方及东南亚流行株亲缘关系较近,但云南株间进化关系较为复杂,可分为六个进化亚群。它们的主要抗原性、致病性、毒力及糖基化等功能位点均未发生明显改变。
结论云南狂犬病病毒流行株具有多样性特点,与省内外、境内外及省内不同地区间犬类流动并传播该病毒相关。云南株狂犬病病毒糖蛋白重要功能位点未发生变异,仍然保持其特有的抗原性和毒力等特征。