人源Fab抗体库的构建和抗HBsAg抗体的筛选和鉴定

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目的 构建人源Fab抗体文库,筛选抗HBsAg抗体片段并进行初步鉴定。方法收集20份临床检验废弃的成人乙肝感染者淋巴细胞,抽提总RNA,逆转录成cDNA,构建抗乙肝病毒人源免疫型Fab抗体文库。以HBsAg包板进行4轮循环的吸附.洗脱.扩增,挑单克隆用Phage-ELISA、DNA测序筛选阳性克隆,对阳性克隆进行可溶性表达,并用ELISA对其特异性进行鉴定。结果构建的人源Fab型抗体文库的库容为2.0×10^8,并具有良好的多样性。经过4轮筛选,成功获得4株能与HBsAg结合的人源抗体克隆,分别
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