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采用C18和C18-HCE高效制备型液相色谱柱联用技术,对蛹虫草中的核苷类化合物进行分离制备,得到腺苷、虫草素、化合物I和化合物II,运用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱、核磁共振波谱进行结构鉴定,并通过MTT法比较虫草素、化合物I和化合物II对HepG2肝癌细胞的影响。结果表明:C18-HCE色谱柱能有效改善极性化合物的保留和选择性,利于核苷类物质的分离纯化;腺苷、虫草素、化合物I、化合物II的纯度和得率分别为90.49%、98.11%、96.34%、98.33%和0.053%、0.253%、0.36