【摘 要】
：
目的 探讨抑癌基因PTEN与其假基因PTENP1在急性白血病(AL)细胞中的表达情况及两者之间的相关性,并观察在白血病细胞系中PTENP1对PTEN的调控作用.方法 应用实时定量PCR方法检测138例初诊AL患者及15名正常对照者骨髓细胞中PTEN与PTENP1 mRNA的表达水平.构建PTENP1 3'UTR的慢病毒载体pCDH1-PTENP1 3'UTR-GFP,磷酸钙共沉淀法转染293T细胞
【机 构】
：
300020天津,中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院，实验血液学国家重点实验室,300020天津,中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院，实验血液学国家重点实验室,
论文部分内容阅读
目的 探讨抑癌基因PTEN与其假基因PTENP1在急性白血病(AL)细胞中的表达情况及两者之间的相关性,并观察在白血病细胞系中PTENP1对PTEN的调控作用.方法 应用实时定量PCR方法检测138例初诊AL患者及15名正常对照者骨髓细胞中PTEN与PTENP1 mRNA的表达水平.构建PTENP1 3'UTR的慢病毒载体pCDH1-PTENP1 3'UTR-GFP,磷酸钙共沉淀法转染293T细胞,病毒原液感染HL-60细胞,流式细胞术分选获得混合克隆.实时定量PCR检测两组不同克隆PTENP1mRNA表达变化,Western blot检测两组不同克隆PTEN蛋白表达变化,MTT法检测细胞增殖抑制率.结果 与正常对照组相比,AL患者骨髓细胞PTEN及PTENPl mRNA表达水平均明显降低(P＜0.05).相关性分析显示,PTEN与PTENP1 mRNA表达水平呈正相关(P＜0.05).将PTENP1阳性急性髓系白血病(AML)组患者(108例)按NCCN 2011年AML治疗指南进行预后分组,各组之间PTEN及PTENP1表达水平无明显差异.pCDH1-PTENP1 3'UTR-GFP病毒原液感染的HL-60细胞,与对照组(pCDHl-GFP)相比,前者感染的HL-60细胞PTENPl mRNA水平明显升高,PTEN mRNA水平亦有升高,但PTEN蛋白表达和细胞增殖无明显变化.结论 AL患者骨髓细胞PTEN及PTENPl mRNA表达水平降低,两者的表达存在相关性.PTENP1可能在mRNA水平对PTEN的表达具有调控作用。
其他文献
目的 分析2005-2011年我科血液病住院患者院内感染的流行病学及其耐药性变迁.方法 收集2005年1月至2011年12月住院血液病患者临床分离菌株1453株,采用微量稀释法进行药敏实验.结果 ①临床分离菌株中呼吸道标本最多为836株(57.5%);血液标本比例占13.60%,高于全院(6.26%);细菌培养送检阳性率52.37%,低于全院(60.24%);化疗导致的粒细胞缺乏是院内感染的主要原
患者,女,17岁.入院前半年出现脱发、关节肿痛,未诊治.入院前2个月无明显诱因出现双下肢紫癜伴咽痛,入院前1周加重伴乏力,入院前3d淋雨后出现高热伴畏寒,在当地医院给予青霉素静滴并输血治疗,发热未能控制.6岁时患甲状腺功能亢进症服用他巴唑2年治愈.入院时血常规:WBC 0.74×109/L、中性粒细胞占0.095、淋巴细胞占0.905,RBC 2.84×1012/L,HGB 91 g/L,PLT
目的 探讨雷帕霉素对慢性髓性白血病(CML)细胞增殖的抑制作用及可能机制.方法 用不同浓度雷帕霉素处理CML细胞系K562细胞,用MTT法检测雷帕霉素对K562细胞的增殖抑制率；Western blot法及RT-PCR法检测不同浓度雷帕霉素作用后的K562细胞中mTOR、4E-BP1、p70S6K蛋白及mRNA表达水平,Western blot法检测CML慢性期患者骨髓原代细胞中mTOR、4E-B
最近,中华医学会血液学分会红细胞疾病(贫血)学组在<中华血液学杂志>发表了<再生障碍性贫血诊断治疗专家共识>[1](以下简称<共识>),这一共识反映了我国临床血液学工作者对于再生障碍性贫血(再障)的现代认识,其规范诊断和治疗的重要意义不言而喻.<共识>主要参考了英国血液学标准委员会<再生障碍性贫血诊断与治疗指南>[2],也结合我国具体情况对一些问题加以强调或提出新见解,如重申诊断再障时网织红细胞绝
目的 研究抗凝血酶(AT)基因C2759T(Leu99Phe)突变引起AT缺陷症的分子机制.方法用大引物法构建C2759T突变体AT重组表达质粒(ATM2759),并将其和正常AT重组质粒(ATN)分别用Superfect试剂转染COS7细胞或CHO细胞,进行体外表达试验和细胞免疫荧光染色.结果转染ATM2759的COS7细胞,培养上清液和细胞裂解液中的AT抗原(AT:Ag)分别为ATN的35.6
目的 研究供受者IFN-γ基因+874位点单核苷酸多态性(SNP)对恶性血液病患者HLA全相合同胞供者异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)疗效的影响.方法 收集80例接受HLA全相合同胞供者allo-HSCT的恶性血液病患者移植前外周血单个核细胞标本,采用序列特异性引物PCR(PCR-SSP)方法检测供受者IFN-γ +874位点SNP,分析供受者不同基因型与移植疗效的相关性.结果 供者为I
儿童非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin's lymphoma,NHL)与成人NHL在临床特点和病理类型方面有所不同,多为恶性程度高并有伞身播散倾向的高侵袭性、弥散性淋巴瘤[1].随着临床研究和化疗方案的进展,国际上儿童淋巴瘤的预后已经明显改善,5年总体生存率已达85%左右[2].目前我国儿童淋巴瘤的诊治水平与国际上相差较大。
目的 观察阻断Th17细胞分化对小鼠小肠急性移植物抗宿主病(aGVHD)的影响.方法 将小鼠分为5组:正常对照组、单纯照射组、异基因骨髓移植(allo-BMT)组、allo-BMT+二甲基亚砜(DMSO)组、allo-BMT+常山酮(HF)组.移植后观察小鼠GVHD发生情况并进行临床和病理评分;移植后第14天(+14 d),用流式细胞术检测外周血Th1、Th17比例及IFN-γ和IL-17A浓度变
目前多发性骨髓瘤(MM)常用的化疗方案有MP(马法兰+泼尼松)、VAD(长春新碱、阿霉素及地塞米松)等,但上述方案治疗起效慢,完全缓解率低,反应持续时间短[1],临床疗效不尽人意.2009年美国国家综合癌症网(National Comprehensive Cancer Network,NCCN)MM诊治指南中将硼替佐米推荐为MM的一线用药[2].近年来多项研究发现其在MM的治疗中取得了较好的疗效[
目的 探讨多重连接探针扩增技术(MLPA)在血友病B(HB)基因诊断中的应用.方法 采用MLPA和短串联重复序列(STR)基因连锁分析对由于凝血因子Ⅸ(F9)基因大片段缺失导致测序失败的2个HB家系进行基因诊断.结果 MLPA检测结果显示,2例HB患者F9基因存在1或2个外显子的缺失,缺失位置Ratio值<0.10;患者母亲相应位置Ratio值为0.50±0.05,可判断为携带者;其他女性受检者R