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目的分析经核苷（酸）类似物治疗并已在血清病毒中产生耐药基因突变的慢性乙肝患者外周血单个核细胞（PBMCs）中HBV共价闭合环状DNA（cccDNA）反转录酶（RT）区的基因突变特点。方法收集2010年7月-2011年8月于解放军302医院住院的慢性乙肝患者30例,均经6个月以上的核苷（酸）类似物抗病毒治疗并已在血清中检测到耐药相关突变。采集与血清检测同一时间点的全血标本30份并分离PBMCs,提取总DNA,以不降解质粒的ATP依赖的DNA酶（PSAD）消化＋滚环扩增＋跨缺口PCR方法扩增HBV cccDN