论文部分内容阅读
目的：
通过体内动物实验与体外细胞实验来阐明microRNA-182（miR-182）在角膜上皮损伤修复中的功能。
方法：实验研究。体内实验选取5只C57BL/6J野生型小鼠，通过机械刮伤法构建小鼠角膜上皮损伤修复模型作为实验组，对侧眼作为对照组，通过实时定量RT-PCR法检测miR-182在损伤修复过程（损伤后48 h）的表达。体外实验采用脂质体介导的方法将miR-182和随机序列寡核苷酸链转染入人角膜上皮细胞（HCECs），通过细胞增殖实验（MTS法）和细胞克隆形成实验检测细胞增殖和生长能力，流式细胞术检测细胞周期，细胞划痕实验检测细胞迁移能力。MiR-182表达量及细胞实验各参数2组间比较采用独立样本t检验。
结果：体内实验中，与对照组相比，实验组中5个样本量的miR-182在角膜上皮损伤修复过程中表达水平显著下调（t=147.6、79.2、136.8、41.3、89.8，均P<0.001）。体外实验中，miR-182组相对细胞数目为（81±5）%，与阴性对照组（100%）相比显著减少（t=6.6，P=0.003），同时miR-182组细胞克隆数明显少于阴性对照组。细胞周期检测结果显示实验组处于G1期细胞数量比例为（49±7）%，明显高于阴性对照组的（35±4）%（t=-3.0，P=0.041）。此外，细胞迁移实验结果显示miR-182组HCECs细胞迁移的距离为（99±12）μm，而阴性对照组的迁移距离为（213±14）μm（t=10.8，P=0.001），迁移速度明显变慢。
结论：miR-182通过抑制角膜上皮细胞的增殖与迁移，从而对角膜上皮损伤修复起到负调控的作用。