观察荷载特异性核基质结合区结合蛋白-1(SATB1)基因短发卡RNA(shRNA)的溶瘤腺病毒(ZD55-SATB1)联合化疗药物奥沙利铂(Oxaliplatin，L-OHP)对人结肠癌SW620细胞增殖和凋亡的影响。
方法将SW620细胞分为5组进行干预，分别为磷酸盐缓冲液(PBS)组、L-OHP组(16 μg/ml)、病毒ZD55-SATB1组[转染倍数(MOI)＝10]、荷载增强绿色荧光蛋白基因(EGFP)的病毒对照组ZD55-EGFP(10 MOI)、ZD55-SATB1联合L-OHP组(10 MOI＋16 μg/ml)。细胞计数试剂盒(CCK-8)法测定单独给药L-OHP(0、4、8、16、32 μg/ml)、单独感染病毒ZD55-SATB1(0、0.1、1.0、10.0、50.0 MOI)干预SW620细胞96 h后细胞存活率，与5实验组干预SW620细胞48 h后细胞存活率；Hoechst33258和膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V/FITC)实验检测细胞凋亡；Western blot检测溶瘤腺病毒早期区1A基因(E1A)、SATB1基因及凋亡相关半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3、Caspase-8、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、bcl-2相关X蛋白(bax)蛋白的表达。
结果CCK-8实验结果显示ZD55-SATB1联合L-OHP组干预SW620细胞48 h后存活率为(35.22±2.42)%，与ZD55-SATB1组(52.18±2.85)%(P＝0.028)、ZD55-EGFP组(60.19±0.82)%(P＝0.036)、L-OHP组(63.29±2.01)%(P＝0.014)比较，对SW620细胞的增殖具有更强的抑制作用；Hoechst33258实验结果显示ZD55-SATB1联合L-OHP组干预SW620细胞48 h后，细胞凋亡率为(59.49±2.53)%，与ZD55-SATB1组(44.24±8.81)%(P＝0.019)、ZD55-EGFP组(23.59±6.28)%(P＝0.026)、L-OHP组(8.61±2.83)%(P＝0.015)比较，联合组对细胞的凋亡有更显著的促进作用；Annexin V碘化丙锭(PI)/FITC实验结果显示ZD55-SATB1联合L-OHP组干预SW620细胞48 h后，细胞凋亡率为(55.84±2.14)%，与ZD55-SATB1组(36.17±1.51)%(P＝0.018)、ZD55-EGFP组(25.43±3.25)%(P＝0.012)、L-OHP组(23.86±1.92)%(P＝0.017)比较，联合组对细胞的凋亡有更显著的促进作用；Western blot结果表明病毒ZD55-SATB1、ZD55-EGFP可在细胞中高效复制，且L-OHP不影响腺病毒在细胞中的复制；ZD55-SATB1联合L-OHP更高效抑制SATB1的表达，同时Caspase-3、Caspase-8、bax表达增加，bcl-2表达降低(P＝0.000)。
结论荷载SATB1基因shRNA的溶瘤腺病毒ZD55-SATB1对结肠癌SW620细胞的增殖起到抑制作用，能诱导细胞凋亡；ZD55-SATB1与L-OHP联合应用的治疗效果优于单药治疗，协同发挥对结肠癌SW620细胞的增殖抑制、凋亡诱导作用。