【摘 要】
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目的 构建编码融合基因nt4-p53(n37)-ha2-tat的重组腺伴病毒表达载体,为恶性肿瘤基因治疗的实验研究奠定基础.方法 采用互补引物二次pcr法以及t载体克隆法获得p53(n37)基因克
【机 构】
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西安交通大学医学院第一附属医院耳鼻咽喉头颈外科,西安交通大学医学院第一附属医院肝胆外科,西安华广生物工程公司
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目的 构建编码融合基因nt4-p53(n37)-ha2-tat的重组腺伴病毒表达载体,为恶性肿瘤基因治疗的实验研究奠定基础.方法 采用互补引物二次pcr法以及t载体克隆法获得p53(n37)基因克隆,酶切后将其连同穿膜肽ha2-tat片段一起连入puc19/nt4质粒,再将融合基因nt4-p53(n37)-ha2-tat亚克隆至腺伴病毒的穿梭质粒psshg-cmv中,构建重组质粒psshg-cmv/nt4-p53(n37)-ha2-tat并进行酶切鉴定;应用磷酸钙沉淀法,psshccmv/nt4-p53(
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