【摘 要】
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环磷酸腺苷(3’,5’-cyclic adenosine monophosphate,cAMP)作为第二信使,其合成受到严格调控。本研究利用已有一定胞外cAMP生产能力的酿酒酵母基因工程菌株G2,考察影响其生
【机 构】
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天津大学化工学院,系统生物工程教育部重点实验室,中国石油大港油田团泊洼开发公司
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划(863计划,2012AA02A701)
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环磷酸腺苷(3’,5’-cyclic adenosine monophosphate,cAMP)作为第二信使,其合成受到严格调控。本研究利用已有一定胞外cAMP生产能力的酿酒酵母基因工程菌株G2,考察影响其生长和发酵生产胞外cAMP的关键工艺参数,进行初步的发酵工艺优化,为下一步的菌种改造和发酵过程优化奠定基础。结果表明:葡萄糖和酵母粉、蛋白胨含量及其配比是本研究考察参数中影响最大的因素,100 g/L葡萄糖和20 g/L酵母粉、40 g/L蛋白胨(简称为2~*YP)培养基发酵的最大cAMP浓度可以达到4311.2±308.3μmol/L,为100 g/L葡萄糖和10 g/L酵母粉、20 g/L蛋白胨(简称为1~*YP)含量下最大值1972.0±122.5μmol/L的2.186倍;添加前体物腺嘌呤(终浓度0.625 g/L)到前述两种培养基中可以进一步提高产量,分别达到4678.1±238.6、3387.3±277.8μmol/L,增幅分别为8.5%和71.8%;添加前体物次黄嘌呤到100 g/L葡萄糖和1~*YP培养基中提高产量6.65%。这些结果提供了进一步优化和进行菌种改造的线索。
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