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DNA双链发生断裂（Double strand break, DSB）时，细胞通常会采用同源重组（Homologous recombination, HR）这一主要修复方式。基于这一原理，人们开发出多种技术引入双链断裂从而实现对基因组 DNA 序列的靶向编辑。真核生物基因敲除或编辑最早通过在外源片段中引入双链断裂和同源臂在酵母中获得成功。30多年来，酵母遗传操作走过了一条从单基因单位点到多基因多位点，乃至最新的基因组合成与重建之路。本文沿着引入DNA双链断裂技术的发展与演变这一主线，对一系列基因编辑及基因