【摘 要】
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目的通过检测多发性骨髓瘤(MM)单核/巨噬细胞相关趋化因子的表达和功能,研究趋化因子CCL-14和CCL-3在MM相关巨噬细胞募集中的作用。方法 q PCR及ELISA检测趋化因子家族在MM患
【机 构】
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浙江大学附属第一医院骨髓移植中心; 克利夫兰医学中心,Lerner 研究所肿瘤生物系; 四川大学华西医院血液科;
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目的通过检测多发性骨髓瘤(MM)单核/巨噬细胞相关趋化因子的表达和功能,研究趋化因子CCL-14和CCL-3在MM相关巨噬细胞募集中的作用。方法 q PCR及ELISA检测趋化因子家族在MM患者BM细胞及上清中的表达。通过免疫组化检测CCL-14和CCL-3在MM患者与健康供者中的表达。采用C57BL/Kaw Rij小鼠及小鼠骨髓瘤细胞株5-TGM-1构建MM小鼠模型。CD14,F4/80标记荷瘤小鼠骨髓巨噬细胞,流式细胞术检测巨噬细胞在趋化因子中和抗体处理组及对照组之间的表达差异。结果通过检测趋化因子家族在MM患者BM中的表达,我们发现MM高表达CCL2(MCP-1)、CCL3(MIP-1α)、CCL4(MIP-1β)、CCL5(RANTES)和CCL14(HCC-1)。ELISA和免疫组化的结果显示,较之正常供者(n=7),MM患者的BM上清(n=11,P<0.05)及骨髓病理切片均存在MIP-1α和HCC-1阳性细胞的大量浸润。我们的研究首次发现MIP-1α和HCC-1在调节单核细胞向MM肿瘤微环境迁移中的作用。细胞趋化实验证实MIP-1α(P<0.05)和HCC-1(P<0.05)的中和抗体可以有效减少单核细胞向MM骨髓微环境迁移的数量。由于小鼠不存在人类HCC-1同源基因,我们采用在小鼠中表达并与人HCC-1基因同源性最高的MIP-1α作为体内试验。C57BL/Kaw Rij小鼠被随机分为MIP-1α中和抗体处理组及对照组,尾静脉注射MM细胞株5-TGM-1建立MM动物模型。通过流式检测巨噬细胞在小鼠BM中的比例,我们发现MIP-1α中和抗体能够明显减少巨噬细胞在BM中的浸润(P<0.05)。最后,我们发现HCC-1在MM骨髓上清中的表达水平与相应患者骨髓巨噬细胞的比例成正比(P<0.05)。结论综上所述,我们的研究揭示了趋化因子CCL-14和CCL-3是单核/巨噬细胞在多发性骨髓瘤浸润中的关键作用因子。体外和体内实验均证实,CCL-14和CCL-3的中和抗体可以显著减少巨噬细胞在MM中的浸润,进而增强MM细胞对化疗药物的敏感性,是MM耐药治疗的新方向。
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