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目的 3,3’-二吲哚甲烷(DIM)是从十字花科芸苔属蔬菜中提取的一种植物化学物,主要是吲哚-3-甲醇(I3C)在胃酸作用下水解而来的一种重要聚合物。其抑癌作用在多种癌症中被报道,但其在抑制胃癌中的分子机制尚不明确。TRAF2作为重要的抗凋亡信号,其抑制肿瘤生长的作用已在前列腺癌、乳腺癌等中被明确报道。本研究旨在胃癌细胞中探索DIM导致TRAF2/p38信号通路及其下游蛋白的变化,以及调控TRAF2、p38表达对DIM所致胃癌细胞凋亡的影响,初步探讨DIM影响TRAF2/p38蛋白变化的可能机制,为明确DIM的抑癌作用以及开发天然植物化学物在肿瘤化学预防与治疗中的应用提供具体思路和方向。方法 1. DIM(0,10,20, 40, 60, 80,100,120μmol/L)处理人胃癌细胞(BGC-823、SGC-7901)细胞12、24、48h后,利用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞活力探究DIM作用浓度。2.不同浓度DIM(0,20, 40, 60, 80μmol/L)处理细胞24h,TUNEL检测细胞凋亡,蛋白印迹法(Western blotting)检测TRAF2、p-p38及其下游Bax、bcl-2、cleaved PARP、cleaved Caspase 3蛋白的表达。3.通过药理学(p38特异性抑制剂SB203580)以及基因学(TRAF2过表达质粒)等手段调控TRAF2/p38信号通路,用Western blotting检测相关蛋白,明确DIM在胃癌细胞中促进细胞凋亡的作用机制。结果 1.DIM的细胞毒性作用呈浓度依赖性,在24h处理后DIM浓度为60μmol/L时,与空白组对比,细胞增殖受到抑制;2. TUNEL检测发现DIM能有效促进胃癌细胞凋亡。3、DIM能显著下调TRAF2,增加p38的磷酸化及其下游Bax、cleaved PARP、cleaved Caspase 3蛋白表达,抗凋亡蛋白bcl-2明显下调。4、利用p38抑制剂SB203580,反向调节了p38下游蛋白,一定程度上抑制了细胞凋亡,MTT显示细胞活力明显回升。5、利用TRAF2过表达质粒,上调TRAF2,反向调节下游蛋白,发挥抗凋亡作用,MTT显示细胞活力回升。结论 DIM可显著诱导胃癌细胞凋亡,该作用可通过调控TRAF2/p38信号通路实现。