TSLP-ERK信号通路在1,25(OH)2D3调控哮喘"耐受性上皮表型"关键分子E-cadherin中的作用

来源 :广东省医学会第十八次呼吸病学学术会议暨2015岭南呼吸论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bin930640
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  研究背景及目的 E钙粘蛋白(E-cadherin)作为气道上皮耐受和促炎表型平衡的分子开关,参与哮喘气道炎症调节.探讨TSLP通路参与1,25(OH)2D3调控E-cadherin表达及屏障保护的分子机制.方法 1、1,25(OH)2D3预处理支气管上皮细胞16HBE140-,并用siRNA下调上皮TSLP,HDM/TDI刺激后,用跨膜电阻、FITC标记右旋糖酐检测上皮屏障功能,western blot,免疫荧光、PCR等检测E-cadherin表达与分布变化.2、观察不同时间点及不同浓度1,25(OH)2D3对TSLP表达的影响,同时观察E-cadherin表达的变化,以此判断VD/TSLP通路在1,25(OH)2D3屏障保护的作用.3、TSLP预处理16HBE140-细胞系,HDM/TDI刺激后用western blot法检测TSLPR、p-ERK、calpain蛋白表达水平.并用TSLPR、ERK和calpain的抑制剂等作用于细胞,探讨TSLP对屏障保护及E-cadherin主要调控环节.设立1,25(OH)2D3作为对照组,比较两者异同.结果 1,25(O-H)2D3预处理可显著抑制致敏原屋尘螨(HDM)引起的E-cadherin的表达和分布的异常,同时细胞分泌TSLP水平上调.HDM可致人支气管上皮细胞TER显著下降和FITC-右旋糖苷通透性显著增加;1,25(OH)2D3和TSLP分别预处理均可逆转TER的下降和FITC-右旋糖苷通透性的增加.结论 TSLP参与了1,25(OH)2D3对E-cadherin及气道上皮屏障保护的调控.
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