目的:探查生肌玉红膏提取液对脂肪干细胞的增殖作用与机制,为构建中医药组织工程血管化支架提供前期基础。方法:实验分为空白组:仅加入细胞培养液与CCK-8溶液,对照组:空白组基础上加入细胞密度为4×10~4/ml P3代的脂肪干细胞悬液0.2ml,实验组:对照组基础上加入生肌玉红膏梯度浓度0.0125、0.025、0.05、0.1mg/ml的生肌玉红膏提取液。表面抗原及脂滴油红O染色与细胞茜素红S染色鉴定脂肪干细胞;CCK法测定脂肪干细胞增殖状况;流式细胞仪测定脂肪干细胞增殖周期及蛋白质印迹法(Western blot)测定脂肪干细胞凋亡相关蛋白Bcl-2,Bax及促血管生长因子VEGF的表达。结果:脂肪干细胞P3代细胞表面抗原CD34阴性,CD90阳性,油红O染色可见细胞中的脂滴且细胞茜素红S染色阳性;生肌玉红膏提取液浓度由低到高刺激脂肪干细胞增殖率逐渐增加,0.05mg/ml时增殖达到高峰,明显高于对照组及浓度为0.0125mg/ml与0.025mg/ml组(p<0.01)及对照组;浓度为0.05mg/ml生肌玉红膏提取液在培养后24h与48h脂肪干细胞细胞周期更多位于DNA合成期与合成后期,比例分别达24%与28%,高于对照组8%左右(P<0.01)并显著促进抑制凋亡蛋白Bcl-2与凋亡蛋白Bax的比例与刺激VEGF表达。结论:生肌玉红膏具有促进脂肪干细胞增殖疗效且0.05mg/ml生肌玉红膏提取液疗效较佳,其作用机制与抗脂肪干细胞凋亡相关。