【摘 要】
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本研究以转Bt基因(Cry1c)甘蔗品种新台糖22号(ROC22)T1代为材料,以受体甘蔗原种为对照,采用RT-PCR法对21个转基因甘蔗株系Bar基因表达进行检测,调查各个株系的主要农艺性
【机 构】
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广西作物遗传改良生物技术重点开放实验室,南宁 530007
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本研究以转Bt基因(Cry1c)甘蔗品种新台糖22号(ROC22)T1代为材料,以受体甘蔗原种为对照,采用RT-PCR法对21个转基因甘蔗株系Bar基因表达进行检测,调查各个株系的主要农艺性状、生物学特性、螟害率等,并测定了植株叶片叶绿素、总蛋白质含量等生理指标,以初步探讨转基因甘蔗外源基因在T1代中表达及其相关农艺生长表现,旨为转基因甘蔗安全评价及其研究提供参考.研究结果如下：(1)优化建立了转Bt甘蔗外源Bar基因的RT-PCR反应体系,在20μL PCR反应体系中,各组分的适宜浓度配比为：模板cDNA 2μL、dNTPs 2.0μL(2.5mmol/L)、Ex-Taq DNA聚合酶0.2μL(5U/μL)、引物1μL(10μmol/L)、10×PCR Buffer 2.0μL(含有Mg2+),加ddH2O至20μL.PCR反应程序的最适退火温度为57.5℃.(2)以Bar基因特异性引物,RT-PCR法均能扩增出在转基因甘蔗后代株系植株叶片中目标特异带,表明外源基因能在转基因甘蔗T1代中稳定表达.(3)农艺性状、生物学特性调查结果表明,部分株系与对照相比在萌芽、分蘖、株高、株高、锤度等农艺性状,根、茎、叶、芽等生物学特性上表现差异不显著.而对照受螟虫为害较重.部分转基因植株在叶片叶绿素含量、蛋白质含量等与对照存在差异.
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