壳寡糖由2～10个氨基葡糖糖通过β-1,4-糖苷键连接而成,因其特殊的生物活性广泛应用于各种领域。已有研究表明聚合度6左右的壳寡糖在抗肿瘤等方面相对其他聚合度壳寡糖具有较高活性。为了可控、高效制备较高聚合度壳寡糖(聚合度4～6),本研究建立了一种酶膜耦合的壳寡糖制备方法(EH-MS),并与膜外直接酶解(EH)过程进行了对比。在壳聚糖酶水解壳聚糖的同时,采用超滤膜分离酶解产物,随后透过液采用纳滤膜浓缩脱盐。试验表明,与膜外直接酶解相比,EH-MS的酶解速度更快,因为减少了产物抑制作用。膜外酶解过程中,酶解液中二糖和三糖的含量逐渐增加,而EH-MS方法几乎无二糖、三糖产生,因高聚合度的壳寡糖在被降解成二糖和三糖前已被超滤膜分离。经薄层层析检测酶膜耦合装置最终所得壳寡糖产物以4～6糖为主。