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目的：人类呼吸道合胞病毒(Humanrespiratory syncytial virus (RSV))RSV是一个单链RNA病毒，副粘病毒子族Pneumovirinae的成员。该病毒是引起婴幼儿病毒性肺炎最常见的病原，主要引起下呼吸道的感染，导致婴幼儿中气管炎和支气管炎的流行。由于母传抗体的不能完全地预防RSV感染的发生，合胞病毒肺炎在出生后任何时候都可能发生。本研究已经表明了IL -6，IL-8，IL - 1A型和RANRES可以由感染RSV的A-549上皮细胞株产生，这些细胞因子／趋化因子浓度在各时间点均有较高的水平。
方法：我们对从206例就诊患儿身上分离出的野生型RSV进行了培养，根据疾病的严重的程度分为初诊，再就诊和住院。所有206株RSV都是初次培养，其中72株显示增长旺盛，这72个病毒株被二次增值，根据MOI筛选出67 (93%)株可以产生足够浓度病毒的毒株用于研究，29例是院外病人，38例为住院病人（其中5例是ICU病房的病人）。67株病毒被接种到HEp-2和A549细胞中(MOI=0.10)进行培养，在37C，5%的二氧化碳条件下培养48，60，和72小时，裂解细胞，4C离心10分钟，收集上清，-80℃保存，以便进一步分析。用PCR扩增N-基因的方法证实63例为RSV-A亚型和4例为RSV-B亚型，用ELISA法测定IL- 1alph，IL-6，IL -8和RANTES (regulated on activationnormal T cell expressed and secreted)浓度。以RSV A-Iong strain(ATCC# VR-26)做为阳性对照，经过x-线照射的RSV为阴性对照，用定量PCR检测上清液中病毒的浓度。用SAS软件对实验结果进行描述性统计。
结果：在各时间点，临床分离出的RSV株产生细胞因子和趋化因子浓度显着高于紫外线照射的RSV对照组(p <0.001)。阳性对照与临床病例分离出来的RSV在各个时间点的细胞因子和趋化因子浓度是一致的。我们测定了RSV感染的Hep-2和A549细胞株产生的细胞因子／趋化因子浓度，在培养48，60和72小时(P<0.05)是增加的。从较重的病例中分离出的RSV接种到A549细胞内，其产生的细胞因子和趋化因子明显地多于较轻的病例分离出的RSV。各个时间段的细胞因子和趋化因子浓度也有不同。整体分析，接种较重病例分离的RSV的A549细胞可产生较多的RANTES和IL -8(RANTES p=0.02，IL-8 p=0.03)。IL-I和IL -6表现出增加趋势，但是没有统计学意义。在接种RSV的两种细胞培养60小时时有一个RANTES产生高峰。从住院病人和门诊病人分离出的RSV产生RANTES和IL-8都有明显地增加，在培养48，60和72小时时，来自住院病人的RSV产生RANTES分别是门诊观察病人的4.27，2.71和2.00倍．IL-8浓度分别增加了为3.96，4.07和1.54倍。病毒浓度与各时间段细胞株产生的细胞因子和趋化因子浓度有相关性，在72小时与IL- 1A型有显著相关性(P<0.001)，与IL-6无显着相关性．IL -8和RANTES的浓度与RSV浓度相关性很高，特别是在48和60小时段。在A549细胞株，细胞因子／趋化因子浓度和RSV-A浓度有相关性，与RSV-B无相关性。
结论：我们的研究表明：IL-6，IL-8，IL-IA型和RANRES可以由感染RSV的A-549上皮细胞株产生，这些细胞因子／趋化因子浓度在各时间点均有较高的水平。在用人类的肺上皮细胞株(A549)培养时，从严重病例分离出的RSV产生的IL-8和RANTES高于从较轻病例分离出的RSV产生的IL-8和RANTES。这些结果符合最近的观察到的，感染RSV婴儿的疾病严重程度与IL-8和RANTES的浓度升高的水平一致。RANTES是一种缓释的细胞因子，与致病性免疫反应Th-1和Th-2有关。虽然患儿产生的细胞因子和趋化因子的量在很大程度上是宿主免疫遗传学的差异造成的。尽管如此，由于患儿疾病严重出与病毒数量相关，这种检测细胞因子浓度推测病毒数量的方法可做一种为改良的病毒生长动力学研究方法。
方法：我们对从206例就诊患儿身上分离出的野生型RSV进行了培养，根据疾病的严重的程度分为初诊，再就诊和住院。所有206株RSV都是初次培养，其中72株显示增长旺盛，这72个病毒株被二次增值，根据MOI筛选出67 (93%)株可以产生足够浓度病毒的毒株用于研究，29例是院外病人，38例为住院病人（其中5例是ICU病房的病人）。67株病毒被接种到HEp-2和A549细胞中(MOI=0.10)进行培养，在37C，5%的二氧化碳条件下培养48，60，和72小时，裂解细胞，4C离心10分钟，收集上清，-80℃保存，以便进一步分析。用PCR扩增N-基因的方法证实63例为RSV-A亚型和4例为RSV-B亚型，用ELISA法测定IL- 1alph，IL-6，IL -8和RANTES (regulated on activationnormal T cell expressed and secreted)浓度。以RSV A-Iong strain(ATCC# VR-26)做为阳性对照，经过x-线照射的RSV为阴性对照，用定量PCR检测上清液中病毒的浓度。用SAS软件对实验结果进行描述性统计。
结果：在各时间点，临床分离出的RSV株产生细胞因子和趋化因子浓度显着高于紫外线照射的RSV对照组(p <0.001)。阳性对照与临床病例分离出来的RSV在各个时间点的细胞因子和趋化因子浓度是一致的。我们测定了RSV感染的Hep-2和A549细胞株产生的细胞因子／趋化因子浓度，在培养48，60和72小时(P<0.05)是增加的。从较重的病例中分离出的RSV接种到A549细胞内，其产生的细胞因子和趋化因子明显地多于较轻的病例分离出的RSV。各个时间段的细胞因子和趋化因子浓度也有不同。整体分析，接种较重病例分离的RSV的A549细胞可产生较多的RANTES和IL -8(RANTES p=0.02，IL-8 p=0.03)。IL-I和IL -6表现出增加趋势，但是没有统计学意义。在接种RSV的两种细胞培养60小时时有一个RANTES产生高峰。从住院病人和门诊病人分离出的RSV产生RANTES和IL-8都有明显地增加，在培养48，60和72小时时，来自住院病人的RSV产生RANTES分别是门诊观察病人的4.27，2.71和2.00倍．IL-8浓度分别增加了为3.96，4.07和1.54倍。病毒浓度与各时间段细胞株产生的细胞因子和趋化因子浓度有相关性，在72小时与IL- 1A型有显著相关性(P<0.001)，与IL-6无显着相关性．IL -8和RANTES的浓度与RSV浓度相关性很高，特别是在48和60小时段。在A549细胞株，细胞因子／趋化因子浓度和RSV-A浓度有相关性，与RSV-B无相关性。
结论：我们的研究表明：IL-6，IL-8，IL-IA型和RANRES可以由感染RSV的A-549上皮细胞株产生，这些细胞因子／趋化因子浓度在各时间点均有较高的水平。在用人类的肺上皮细胞株(A549)培养时，从严重病例分离出的RSV产生的IL-8和RANTES高于从较轻病例分离出的RSV产生的IL-8和RANTES。这些结果符合最近的观察到的，感染RSV婴儿的疾病严重程度与IL-8和RANTES的浓度升高的水平一致。RANTES是一种缓释的细胞因子，与致病性免疫反应Th-1和Th-2有关。虽然患儿产生的细胞因子和趋化因子的量在很大程度上是宿主免疫遗传学的差异造成的。尽管如此，由于患儿疾病严重出与病毒数量相关，这种检测细胞因子浓度推测病毒数量的方法可做一种为改良的病毒生长动力学研究方法。