【摘 要】
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沙门氏菌是重要的食源性致病菌,有多达2600个血清型,对其鉴定与血清分型是食品安全监测和临床诊断中必不可少的环节.快速和高准确率的聚合酶链式反应(PCR)具有巨大的应用
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沙门氏菌是重要的食源性致病菌,有多达2600个血清型,对其鉴定与血清分型是食品安全监测和临床诊断中必不可少的环节.快速和高准确率的聚合酶链式反应(PCR)具有巨大的应用潜力.本研究采用比较基因组学的方法,获得了412个沙门氏菌候选检测靶点,GO分析发现,与致病性相关的基因呈现显著的富集现象.随后,对这些候选靶点的对应引物进行特异性和灵敏度的评估,得到15个具有良好性能的靶点,即:在151个沙门氏菌中有单一明亮的扩增条带,在34个非沙门氏菌中无扩增.同时,检测限分别为27.6 fg/PCR(Salmonella Enteritidis ATCC 13076),17.8fg/PCR(Salmonella Typhimurium ATCC 14028).另外,已验证靶点与看家基因具有高度相似的多基因聚类树,特别是在沙门氏菌血清型差异区分方面.而且,39株沙门氏菌(属于6个血清型)靶点S9对应的测序结果,进一步表明特异检测靶点具有潜在的血清分型能力.总之,15个已验证靶点可用于沙门氏菌PCR快速检测,并且它们极有可能具备检测与血清分型的双重作用.
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