【摘 要】
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运用免疫荧光、western b1ot和RT-PCR,获得体外培养的下丘脑星形胶质细胞表达GnRHR的证据。在此基础上,利用荧光定量PCR、western blot、ELISA研究了GnRH对星形胶质细胞PGE2
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(30700587);西南大学中央高校基本科研业务费重点资助项目(XDJK2010B014)
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运用免疫荧光、western b1ot和RT-PCR,获得体外培养的下丘脑星形胶质细胞表达GnRHR的证据。在此基础上,利用荧光定量PCR、western blot、ELISA研究了GnRH对星形胶质细胞PGE2合成的影响。结果表明:(1)分别用10-12、10-10、10-8、10-6 mol/L的GnRH处理AST 1,6,12,24,48h,发现10-10 mo儿的GnRH处理AST 12 h,对AST PGE2的合成具有显著促进作用;10-8 mol/L处理1、6、24h,10-6 mol/L处理6、12、24、48h,对PGE2合成具有显著抑制作用;10-12 mol/L的GnRH对PGE2合成无影响;(2)用10-10mol/LGnRH处理AST 1、6、12、24、48h,与对照组比较,COX-1 mRNA在12h时显著增加(P<0.05),COX-2 mRNA在6、12h时增加显著(P<0.05);COX-1、COX-2的蛋白表达量在处理12h后均显著上调(P<0.05)。(3)COX-1抑制剂SC-560、COX-2的抑制剂NS-398对GnRH诱导的AST PGE2的合成均具有显著的抑制作用,且NS-398抑制作用更强。以上结果揭示,GnRH可以通过与GnRHR结合,上调COX-1、COX-2表达,促进PGE2的合成分泌,从而实现对GnRH神经元分泌GnRH的反馈调控。
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