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目的:1.通过VAS疼痛评分、关节压痛分级、晨起关节僵硬分级、HISS膝关节评分、中医症候评分观察评估中药塌渍法治疗寒凝血瘀型KOA患者临床效果。
2.观察中药塌渍法对KOA软骨细胞MMP-3、MMP-13、BMP-2mRNA的表达量和β-catenin、GSK-3β蛋白表达水平的影响,探讨中药塌渍疗法通过Wnt/β-catenin信号通路靶向治疗KOA的作用机制。
方法:1.将90例符合纳入标准的KOA患者随机分成治疗组和对照组各45例,治疗组予中药塌渍疗法(活血通痹汤)治疗,对照组予扶他林外涂治疗,分别记录每个KOA患者治疗前后的VAS疼痛评分、关节压痛分级、晨起关节僵硬分级、HISS膝关节评分、中医症候评分。
2.将72只新西兰大白兔随机分为6组,每组各12只:①空白组;②模型组;③扶他林外用对照组;④中药塌渍治疗组(42℃);⑤中药塌渍治疗组(37℃);⑥中药塌渍治疗组(32℃);根据经典的Videman石膏管型固定法进行造模,从造模开始后第5周对③、④、⑤、⑥组分别给予外用西药及不同中药外治干预,空白及模型组正常饲养,时间为4周,用药28天后处死兔子,然后取兔子软骨材料。RT-PCR法检测MMP-3、MMP-13、BMP-2mRNA的表达量;Western blot法检测β-catenin、GSK-3β蛋白表达。
结果:1.临床治疗疗效比较:治疗组在改善HISS膝关节评分,降低关节压痛分级、晨起关节僵硬分级和VAS疼痛评分、中医证候评分方面较对照组有明显优势(P<0.05)。
2.RT-PCR法检测MMP-3、MMP-13、BMP-2mRNA的表达量:模型组软骨组织的MMP-3、MMP-13、BMP-2mRNA的表达量均最高,空白对照组mRNA的表达量最低,治疗组mRNA的表达量均高于空白对照组低于模型组,治疗组组内比较,mRNA的表达量从高到低依次是32℃中药塌渍组、扶他林对照组、37℃中药塌渍组、42℃中药塌渍组。差异有统计学意义(P<0.05)。
3.Western blot法检测软骨组织中β-catenin、GSK-3β蛋白表达:模型组软骨组织的β-catenin、GSK-3β表达水平最高,空白对照组表达水平最低,治疗组表达水平均高于空白对照组低于模型组,治疗组组内比较,表达水平从高到低依次是32℃中药塌渍组、扶他林对照组、37℃中药塌渍组、42℃中药塌渍组,差异有统计学意义(P<0.05)。
结论:1.中药塌渍法对寒凝血瘀型KOA患者的HISS膝关节评分、VAS疼痛评分、关节压痛分级、晨起关节僵硬分级、中医症候评分有明显改善作用。
2.中药塌渍法可通过调控Wnt/β-catenin信号通路,抑制软骨细胞中β-catenin、GSK-3β蛋白表达,减少MMP-3、MMP-13、BMP-2mRNA的表达。
2.观察中药塌渍法对KOA软骨细胞MMP-3、MMP-13、BMP-2mRNA的表达量和β-catenin、GSK-3β蛋白表达水平的影响,探讨中药塌渍疗法通过Wnt/β-catenin信号通路靶向治疗KOA的作用机制。
方法:1.将90例符合纳入标准的KOA患者随机分成治疗组和对照组各45例,治疗组予中药塌渍疗法(活血通痹汤)治疗,对照组予扶他林外涂治疗,分别记录每个KOA患者治疗前后的VAS疼痛评分、关节压痛分级、晨起关节僵硬分级、HISS膝关节评分、中医症候评分。
2.将72只新西兰大白兔随机分为6组,每组各12只:①空白组;②模型组;③扶他林外用对照组;④中药塌渍治疗组(42℃);⑤中药塌渍治疗组(37℃);⑥中药塌渍治疗组(32℃);根据经典的Videman石膏管型固定法进行造模,从造模开始后第5周对③、④、⑤、⑥组分别给予外用西药及不同中药外治干预,空白及模型组正常饲养,时间为4周,用药28天后处死兔子,然后取兔子软骨材料。RT-PCR法检测MMP-3、MMP-13、BMP-2mRNA的表达量;Western blot法检测β-catenin、GSK-3β蛋白表达。
结果:1.临床治疗疗效比较:治疗组在改善HISS膝关节评分,降低关节压痛分级、晨起关节僵硬分级和VAS疼痛评分、中医证候评分方面较对照组有明显优势(P<0.05)。
2.RT-PCR法检测MMP-3、MMP-13、BMP-2mRNA的表达量:模型组软骨组织的MMP-3、MMP-13、BMP-2mRNA的表达量均最高,空白对照组mRNA的表达量最低,治疗组mRNA的表达量均高于空白对照组低于模型组,治疗组组内比较,mRNA的表达量从高到低依次是32℃中药塌渍组、扶他林对照组、37℃中药塌渍组、42℃中药塌渍组。差异有统计学意义(P<0.05)。
3.Western blot法检测软骨组织中β-catenin、GSK-3β蛋白表达:模型组软骨组织的β-catenin、GSK-3β表达水平最高,空白对照组表达水平最低,治疗组表达水平均高于空白对照组低于模型组,治疗组组内比较,表达水平从高到低依次是32℃中药塌渍组、扶他林对照组、37℃中药塌渍组、42℃中药塌渍组,差异有统计学意义(P<0.05)。
结论:1.中药塌渍法对寒凝血瘀型KOA患者的HISS膝关节评分、VAS疼痛评分、关节压痛分级、晨起关节僵硬分级、中医症候评分有明显改善作用。
2.中药塌渍法可通过调控Wnt/β-catenin信号通路,抑制软骨细胞中β-catenin、GSK-3β蛋白表达,减少MMP-3、MMP-13、BMP-2mRNA的表达。