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目的1、分析自噬蛋白LC3-Ⅱ、激肽释放酶KLK6/8以及闭合蛋白Claudin-3/4在不同卵巢浆液性肿瘤组织中的阳性表达率及表达水平；2、探讨在卵巢浆液性囊腺癌患者中，自噬蛋白LC3-Ⅱ、激肽释放酶KLK6/8以及闭合蛋白Claudin-3/4的表达水平与肿瘤FIGO分期、病理学分级以及是否合并淋巴结转移的相关性；3、探讨自噬蛋白LC3-Ⅱ、激肽释放酶KLK6/8以及闭合蛋白Claudin-3/4的表达水平对卵巢浆液性囊腺癌患者临床远期预后的影响。
方法
1.选取我院2015年1月-2017年1月经病理学诊断为卵巢浆液性肿瘤的患者108例。其中浆液性囊腺瘤（研究A组）42例，交界性浆液性囊腺瘤（研究B组）27例，浆液性囊腺癌39例，同时选取2010年1月至2014年12月经病理学诊断为卵巢浆液性囊腺癌患者80例，共同组成研究C组（119例）。对照组：选取正常卵巢上皮组织46例作为对照。
采用免疫组织化学法检测正常卵巢组织以及卵巢浆液性肿瘤组织中自噬蛋白LC3-Ⅱ、激肽释放酶KLK6/8以及闭合蛋白Claudin-3/4的阳性表达率及表达水平。采用Western-blot检测方法检测各组中自噬蛋白LC3-Ⅱ、激肽释放酶KLK6/8以及闭合蛋白Claudin-3/4的含量，分析在正常的卵巢组织及不同卵巢浆液性肿瘤组织中自噬蛋白LC3-Ⅱ、激肽释放酶KLK6/8以及闭合蛋白Claudin-3/4的阳性表达率及表达水平的差异。
2.对于经病理学诊断为卵巢浆液性囊腺癌的119例患者，分析自噬蛋白LC3-Ⅱ、激肽释放酶KLK6/8以及闭合蛋白Claudin-3/4的表达水平与患者年龄、肿瘤大小、病理学分级、肿瘤FIGO分期、绝经状态以及淋巴结转移等临床因素的相关性。
3.对所有卵巢浆液性囊腺癌患者进行为期1至8年的临床随访，分析自噬蛋白LC3-Ⅱ、激肽释放酶KLK6/8以及闭合蛋白Claudin-3/4的表达水平对卵巢浆液性囊腺癌患者临床远期预后的影响。
4.采用SPSS18.0软件进行统计分析，计量资料以均数±标准差表示，多组间的比较用单因素方差分析，进一步采用LSD进行组间的两两比较；计数资料用百分数（%）表示，多组比较用卡方检验，组间的两两比较用行×列表的卡方分割法，双向有序分类资料用关联性检验；采用多因素Logistic回归分析临床死亡的相关危险因素，采用Kaplan-Meier生存曲线Log-rank检验比较各组间患者生存曲线的差别，采用多因素Cox回归分析影响卵巢浆液性囊腺癌患者远期预后的独立危险因素，以P＜0.05时，表示差异有统计学意义。
结果
1.各组间自噬蛋白LC3-Ⅱ的表达水平比较：对照组、研究A组、研究B组、研究C组噬蛋白LC3-Ⅱ阳性表达率分别为0%、52.4%、92.6%、95.0%，交界性浆液性囊腺瘤组及浆液性囊腺癌组LC3-Ⅱ阳性表达率及表达水平高于正常对照组及浆液性囊腺瘤组，差异具有统计学意义（P＜0.01）。LC3-Ⅱ的表达水平有随浆液性肿瘤恶性程度增高而增高的趋势（P＜0.001）。Western-blot结果显示，对照组、研究A组、研究B组、研究C组自噬蛋白LC3-Ⅱ的浓度逐渐增高，各组比较均有统计学差异（P均＜0.05）。在浆液性囊腺癌患者中，自噬蛋白LC3-Ⅱ的表达水平与肿瘤的FIGO分期、病理学分级及有无淋巴转移相关（P＜0.05），而与患者的年龄分组、肿瘤大小及绝经状态无相关性（P>0.05）。
2.各组间KLK6、KLK8蛋白的表达水平比较：对照组、研究A组、研究B组、研究C组KLK6阳性表达率分别为0%、23.8%、77.8%、79.9%，交界性浆液性囊腺瘤组与浆液性囊腺癌组KLK6阳性表达率及表达水平高于正常对照组与浆液性囊腺瘤组，差异具有统计学意义（P＜0.01）。对照组、研究A组、研究B组、研究C组KLK8阳性表达率分别为0%、26.2%、25.9%、60.5%，浆液性囊腺癌组KLK8阳性表达率及表达水平高于正常对照组、浆液性囊腺瘤组及交界性浆液性囊腺瘤组，差异具有统计学意义（P＜0.01）。KLK6、KLK8的表达水平有随浆液性肿瘤恶性程度增高而增高的趋势（P＜0.001）。Western-blot结果显示，对照组、研究A组、研究B组、研究C组噬蛋白KLK6与KLK8的浓度逐渐增高，各组比较均有统计学差异（P均＜0.05）。在浆液性囊腺癌患者中，KLK6、KLK8蛋白的表达水平与肿瘤的FIGO分期、病理学分级及有无淋巴转移相关（P＜0.05），而与患者的年龄分组、肿瘤大小及绝经状态无相关性（P＞0.05）。
3.各组间闭合蛋白Claudin-3、Claudin-4的表达水平比较：对照组、研究A组、研究B组、研究C组Claudin-3蛋白阳性表达率分别为0.0%、35.7%、51.9%、79.0%、Claudin-4蛋白阳性表达率分别为0.0%、23.8%、37.0%、78.2%，交界性浆液性囊腺瘤组与浆液性囊腺癌组Claudin-3与Claudin-4阳性表达率及表达水平高于正常对照组与浆液性囊腺瘤组，差异具有统计学意义（P＜0.01）。Claudin-3与Claudin-4的表达水平有随浆液性肿瘤恶性程度增高而增高的趋势（P＜0.001）。Western-blot结果显示，对照组、研究A组、研究B组、研究C组Claudin-3与Claudin-4蛋白的浓度逐渐增加，各组比较均有统计学差异（P均＜0.05）。在浆液性囊腺癌患者中，Claudin-3/4蛋白的表达水平与肿瘤的FIGO分期、病理学分级及有无淋巴转移相关（P＜0.05），而与患者的年龄分组、肿瘤大小及绝经状态无相关性（P＞0.05）。
4.我们对119例卵巢浆液性囊腺癌患者进行了为期1至8年的临床随访，分析患者死亡的相关危险因素，多因素Logistic回归分析显示，肿瘤病理学分级、FIGO分期、合并淋巴结转移、以及自噬蛋白LC3-Ⅱ、KLK6、闭合蛋白Claudin-3的高表达是患者死亡的独立危险因素。通过Kaplan-Meier生存曲线Log-rank检验显示自噬蛋白LC3-Ⅱ、KLK6/8、闭合蛋白Claudin-3/4不同表达水平组间生存曲线及中位生存期均有统计学差异（P＜0.01）。多因素Cox回归分析显示，肿瘤的病理学分级、FIGO分期、合并淋巴结转移以及自噬蛋白LC3-Ⅱ、闭合蛋白Claudin-3的高表达是卵巢浆液性囊腺癌患者远期预后的独立危险因素。
结论：1、自噬蛋白LC3-Ⅱ、KLK6/8以及闭合蛋白Claudin-3/4的阳性表达率及表达水平与卵巢浆液性肿瘤的良恶性程度相关；2、在浆液性囊腺癌患者中，自噬蛋白LC3-Ⅱ、KLK6/8以及闭合蛋白Claudin-3/4的表达水平与肿瘤FIGO分期、病理学分级及是否合并淋巴结转移相关；3、自噬蛋白LC3-Ⅱ、闭合蛋白Claudin-3的高表达是卵巢浆液性囊腺癌患者远期预后的独立危险因素。自噬蛋白LC3-Ⅱ、闭合蛋白Claudin-3在组织中的高表达可能在卵巢浆液性囊腺癌的发生及发展中起到了重要作用。
方法
1.选取我院2015年1月-2017年1月经病理学诊断为卵巢浆液性肿瘤的患者108例。其中浆液性囊腺瘤（研究A组）42例，交界性浆液性囊腺瘤（研究B组）27例，浆液性囊腺癌39例，同时选取2010年1月至2014年12月经病理学诊断为卵巢浆液性囊腺癌患者80例，共同组成研究C组（119例）。对照组：选取正常卵巢上皮组织46例作为对照。
采用免疫组织化学法检测正常卵巢组织以及卵巢浆液性肿瘤组织中自噬蛋白LC3-Ⅱ、激肽释放酶KLK6/8以及闭合蛋白Claudin-3/4的阳性表达率及表达水平。采用Western-blot检测方法检测各组中自噬蛋白LC3-Ⅱ、激肽释放酶KLK6/8以及闭合蛋白Claudin-3/4的含量，分析在正常的卵巢组织及不同卵巢浆液性肿瘤组织中自噬蛋白LC3-Ⅱ、激肽释放酶KLK6/8以及闭合蛋白Claudin-3/4的阳性表达率及表达水平的差异。
2.对于经病理学诊断为卵巢浆液性囊腺癌的119例患者，分析自噬蛋白LC3-Ⅱ、激肽释放酶KLK6/8以及闭合蛋白Claudin-3/4的表达水平与患者年龄、肿瘤大小、病理学分级、肿瘤FIGO分期、绝经状态以及淋巴结转移等临床因素的相关性。
3.对所有卵巢浆液性囊腺癌患者进行为期1至8年的临床随访，分析自噬蛋白LC3-Ⅱ、激肽释放酶KLK6/8以及闭合蛋白Claudin-3/4的表达水平对卵巢浆液性囊腺癌患者临床远期预后的影响。
4.采用SPSS18.0软件进行统计分析，计量资料以均数±标准差表示，多组间的比较用单因素方差分析，进一步采用LSD进行组间的两两比较；计数资料用百分数（%）表示，多组比较用卡方检验，组间的两两比较用行×列表的卡方分割法，双向有序分类资料用关联性检验；采用多因素Logistic回归分析临床死亡的相关危险因素，采用Kaplan-Meier生存曲线Log-rank检验比较各组间患者生存曲线的差别，采用多因素Cox回归分析影响卵巢浆液性囊腺癌患者远期预后的独立危险因素，以P＜0.05时，表示差异有统计学意义。
结果
1.各组间自噬蛋白LC3-Ⅱ的表达水平比较：对照组、研究A组、研究B组、研究C组噬蛋白LC3-Ⅱ阳性表达率分别为0%、52.4%、92.6%、95.0%，交界性浆液性囊腺瘤组及浆液性囊腺癌组LC3-Ⅱ阳性表达率及表达水平高于正常对照组及浆液性囊腺瘤组，差异具有统计学意义（P＜0.01）。LC3-Ⅱ的表达水平有随浆液性肿瘤恶性程度增高而增高的趋势（P＜0.001）。Western-blot结果显示，对照组、研究A组、研究B组、研究C组自噬蛋白LC3-Ⅱ的浓度逐渐增高，各组比较均有统计学差异（P均＜0.05）。在浆液性囊腺癌患者中，自噬蛋白LC3-Ⅱ的表达水平与肿瘤的FIGO分期、病理学分级及有无淋巴转移相关（P＜0.05），而与患者的年龄分组、肿瘤大小及绝经状态无相关性（P>0.05）。
2.各组间KLK6、KLK8蛋白的表达水平比较：对照组、研究A组、研究B组、研究C组KLK6阳性表达率分别为0%、23.8%、77.8%、79.9%，交界性浆液性囊腺瘤组与浆液性囊腺癌组KLK6阳性表达率及表达水平高于正常对照组与浆液性囊腺瘤组，差异具有统计学意义（P＜0.01）。对照组、研究A组、研究B组、研究C组KLK8阳性表达率分别为0%、26.2%、25.9%、60.5%，浆液性囊腺癌组KLK8阳性表达率及表达水平高于正常对照组、浆液性囊腺瘤组及交界性浆液性囊腺瘤组，差异具有统计学意义（P＜0.01）。KLK6、KLK8的表达水平有随浆液性肿瘤恶性程度增高而增高的趋势（P＜0.001）。Western-blot结果显示，对照组、研究A组、研究B组、研究C组噬蛋白KLK6与KLK8的浓度逐渐增高，各组比较均有统计学差异（P均＜0.05）。在浆液性囊腺癌患者中，KLK6、KLK8蛋白的表达水平与肿瘤的FIGO分期、病理学分级及有无淋巴转移相关（P＜0.05），而与患者的年龄分组、肿瘤大小及绝经状态无相关性（P＞0.05）。
3.各组间闭合蛋白Claudin-3、Claudin-4的表达水平比较：对照组、研究A组、研究B组、研究C组Claudin-3蛋白阳性表达率分别为0.0%、35.7%、51.9%、79.0%、Claudin-4蛋白阳性表达率分别为0.0%、23.8%、37.0%、78.2%，交界性浆液性囊腺瘤组与浆液性囊腺癌组Claudin-3与Claudin-4阳性表达率及表达水平高于正常对照组与浆液性囊腺瘤组，差异具有统计学意义（P＜0.01）。Claudin-3与Claudin-4的表达水平有随浆液性肿瘤恶性程度增高而增高的趋势（P＜0.001）。Western-blot结果显示，对照组、研究A组、研究B组、研究C组Claudin-3与Claudin-4蛋白的浓度逐渐增加，各组比较均有统计学差异（P均＜0.05）。在浆液性囊腺癌患者中，Claudin-3/4蛋白的表达水平与肿瘤的FIGO分期、病理学分级及有无淋巴转移相关（P＜0.05），而与患者的年龄分组、肿瘤大小及绝经状态无相关性（P＞0.05）。
4.我们对119例卵巢浆液性囊腺癌患者进行了为期1至8年的临床随访，分析患者死亡的相关危险因素，多因素Logistic回归分析显示，肿瘤病理学分级、FIGO分期、合并淋巴结转移、以及自噬蛋白LC3-Ⅱ、KLK6、闭合蛋白Claudin-3的高表达是患者死亡的独立危险因素。通过Kaplan-Meier生存曲线Log-rank检验显示自噬蛋白LC3-Ⅱ、KLK6/8、闭合蛋白Claudin-3/4不同表达水平组间生存曲线及中位生存期均有统计学差异（P＜0.01）。多因素Cox回归分析显示，肿瘤的病理学分级、FIGO分期、合并淋巴结转移以及自噬蛋白LC3-Ⅱ、闭合蛋白Claudin-3的高表达是卵巢浆液性囊腺癌患者远期预后的独立危险因素。
结论：1、自噬蛋白LC3-Ⅱ、KLK6/8以及闭合蛋白Claudin-3/4的阳性表达率及表达水平与卵巢浆液性肿瘤的良恶性程度相关；2、在浆液性囊腺癌患者中，自噬蛋白LC3-Ⅱ、KLK6/8以及闭合蛋白Claudin-3/4的表达水平与肿瘤FIGO分期、病理学分级及是否合并淋巴结转移相关；3、自噬蛋白LC3-Ⅱ、闭合蛋白Claudin-3的高表达是卵巢浆液性囊腺癌患者远期预后的独立危险因素。自噬蛋白LC3-Ⅱ、闭合蛋白Claudin-3在组织中的高表达可能在卵巢浆液性囊腺癌的发生及发展中起到了重要作用。