【摘 要】
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邻苯二甲酸酯类及二噁英类都属于环境激素类物质,邻苯二甲酸酯类物质广泛应用于塑料制品,二噁英类主要产生于垃圾焚烧中,这些物质不断释放自然环境中,不仅污染环境,同时也对
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邻苯二甲酸酯类及二噁英类都属于环境激素类物质,邻苯二甲酸酯类物质广泛应用于塑料制品,二噁英类主要产生于垃圾焚烧中,这些物质不断释放自然环境中,不仅污染环境,同时也对人体健康构成巨大威胁。本文以土壤分离菌株Rhodococcus sp. strain p52为材料,对其降解邻苯二甲酸酯类中代表性化合物邻苯二甲酸二(2-乙基已)酯(DEHP)的能力进行了相关研究,结果表明Rhodococcus sp. strain p52在9天时间里对初始浓度为200mg/L的DEHP的降解率达到75%,另外正交实验结果表明环境因子对DEHP降解率的影响程度如下：DEHP初始浓度>温度>pH。Rhodococcus sp. strain p52中含有两套能够以有角度方式代谢二苯并呋喃(DF)的双加氧酶系统,其编码基因簇分别为dbfA和dfdA,本文分别对dbfA基因簇中的末端加氧酶dbfA1A2基因、dfdA基因簇中的铁氧还蛋白dfdA3基因和铁氧还蛋白还原酶dfdA4基因进行了克隆及表达分析。通过SDS-PAGE实验检测表达产物,表明dbfA1A2基因表达产物中含有两条带,分别代表末端加氧酶大小亚基dbfA1及dbfA2基因表达产物,其大小分别在65KDa及22KDa左右,并且主要以包涵体形式存在于大肠杆菌BL21(DE3)宿主细胞中；dfdA3基因表达蛋白大小在33KDa左右,表达产物主要以可溶性蛋白形式存在；dfdA4基因表达蛋白大小在65KDa左右,其表达蛋白主要以包涵体形式存在。在以上基础上,本文还初步探讨了含dbfA1A2基因的重组大肠杆菌BL21(DE3)对二苯并呋喃(DF)的降解能力,结果表明,该菌株在18h内对初始浓度为200mg/L的DF去除率达到90%以上,初步证明了dbfA1A2基因表达产物在催化降解DF方面的重要作用。综上,Rhodococcus sp. strain p52对DEHP具有一定的降解能力,对于邻苯二甲酸酯类造成的环境污染表现出潜在的生物修复能力。二苯并呋喃双加氧酶相关基因的克隆表达实验对未来进一步开展二嗯英类降解的理论及应用研究提供了必要的基础。
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