由农、兽药残留引发的食品污染已成为公众关注的主要食品安全问题。这些残留物质会通过食物,或食物链累积进入人体,危害身体健康。色谱技术因其强大的分离分析能力在食品农兽药残留检测中发挥重要作用。由于食品基质复杂、被测分析物本身化学性质及其低含量的限制,直接进行色谱分析往往达不到理想效果,需要对化合物进行衍生化提高检测灵敏度。然而,传统的衍生化方法通常是针对分析物结构中的羟基、羧基、氨基等基团,衍生效果容易受到食品中氨基酸、脂质等物质的干扰,导致反应选择性差。因此,开发具有高灵敏度、高特异性的衍生标记方法,对于准确检测食品中痕量农兽药残留有重要意义。铜催化叠氮与炔烃的偶极环加成反应（Copper（Ⅰ）-Catalyzed Azide-Alkyne Cycloaddition,CuAAC）反应具有高度专一的区域选择性,反应条件温和且产物唯一,在化学衍生领域展示出了其独特的优势。本文基于CuAAC反应,设计了两种以叠氮基团为反应端的标记试剂,并结合色谱分析,用于食品样品中农兽药的痕量残留检测。主要研究内容如下:（1）设计并合成了一对新型点击同位素编码质谱探针d0-N（2-叠氮乙基）苯胺（d0-AEA）和d5-N（2-叠氮乙基）苯胺（d5-AEA）。该质谱探针以苯环作为主体同位素标签部分,最末端连接的叠氮基团为反应活性基团。核磁共振氢谱证实,所合成标记试剂的化学结构与理论设计相符。之后,通过质谱对化合物分子量与碎裂行为进行研究。结果表明,轻型标记探针分子量为162,重型标记探针的分子量为167,符合理论数值。并且,d0/d5-AEA经质谱电离后可以产生规律的子离子信号,能够作为标记质谱探针使用。（2）利用合成的d0/d5-AEA作为标记探针,建立了一种高选择性、高灵敏度的稳定同位素标记-高效液相色谱串联质谱法（SIL-HPLC-MS/MS）用于测定食品中的类固醇激素残留。在最佳条件下,以d5-AEA标记的标准品溶液为内标,与d0-AEA标记的样品等比例混合,两者经历相同的电离过程,一定程度上补偿了电离竞争引起的定量偏差。d0/d5-AEA上携带的易电离基团通过CuAAC反应被引入到被分析物的分子结构中,提高了其在正离子模式下的电离效率。此外,衍生标记改善了 SIL分析时类固醇激素的碎裂行为从而进一步提高质谱分析的检测灵敏度。所提出的方法用于检测不同食品样品（牛奶、酸奶、鸡蛋）中六种合成类固醇激素的残留水平,获得的回收率在85%到102%范围内,RSDs小于6.8%,表明具有良好的准确性和精密度。（3）基于CuAAC反应提出了一种点击稳定同位素标记策略,并结合HPLC-MS/MS分析,对蔬菜中的除草剂残留进行了灵敏、高效检测。该方法在最优条件下,使用d0/d5-AEA分别标记存在于样品和标准品中待测物。在分析时,将轻型标记的样品与重型标记的标准品等体积混合,两者同时经历洗脱、电离过程,出峰时间几乎相同且峰形相似,减小了基质效应对定量结果的影响。经d0/d5-AEA标记后,由于易质子化基团的引入,使得除草剂的电离效率提高了 10-100倍。应用建立的方法对新鲜大豆、莴苣、胡萝卜等蔬菜样品中4种除草剂地残留水平进行测定,所得LOD为0.004-0.31 μg kg-1。回收率为96.9-102.3%,RSDs小于7.3%,表明该方法对食品中痕量除草剂的分析具有明显的优势。（4）利用已经商品化的3-叠氮-7-羟基香豆素作为荧光标记试剂,建立了一种点击触发开启的荧光标记策略,并结合高效液相色谱-荧光检测器（HPLC-FLD）,对肉类样品（鸡肉、牛肉、羊肉）中五种类固醇激素进行检测。在标记过程中,3-叠氮-7-羟基香豆素与分析物发生CuAAC点击反应,从而开启反应体系的荧光。所形成的荧光衍生物在激发波长395 nm,发射波长470 nm处,有明显的荧光信号。所建立方法具有良好的线性关系（R2≥0.9998）和较低的检测限（1.8-7.3 μg L-1）。用于真实肉类样品中五种类固醇激素的检测,所得回收率在82-107%之间,RSDs小于5.7%,表明该方法在类固醇激素的残留检测中具有一定的应用前景。