具有益生特性乳酸菌的筛选及其应用

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本研究对分离自雪莲菌的20株乳酸菌酸进行益生特性研究,首先通过耐酸性和对模拟胃肠液耐受能力进行初筛,然后进一步通过考察乳酸菌的自凝聚能力、疏水性能、抗氧化能力、抑菌活性、抗生素敏感性和溶血活性等特性筛选出益生特性好的乳酸菌,最后以麦芽汁和糙米汁为原料进行发酵,通过发酵工艺的优化,以期生产出具有益生特性的谷物饮料。具体研究内容如下:(1)乳酸菌耐受性初筛将分离自雪莲菌的20株乳酸菌接种到p H 3.0和2.5的MRS培养基中测定菌株的耐受性。结果表明:19株菌能够在p H 3.0的环境中存活,有11株菌能在p H 2.5的环境中存活;将11株菌过模拟人工胃肠液后由8株菌的活菌数达到10~6CFU/m L以上。(2)乳酸菌益生特性评价8株乳酸菌经自凝聚测定结果表明:RG-1和GG-2有较高的自凝聚性,BG-1和GG-1自凝聚能力处于中等水平,NC-1、KF2-6、BG-2和CQ-2自凝聚能力较低;经疏水性测定结果表明:BG-2、GG-2、KF2-6和RG-1对乙酸乙酯有较高的疏水性,BG-1、BG-2、GG-1、GG-2、KF2-6、RG-1、NC-1和CQ-2对乙醚的疏水性均处于中等水平;经抗氧化活性测定结果发现:RG-1的DPPH自由基清除活性较高,BG-2、KF2-6和NC-18处于中等水平,菌株KF2-6的羟基自由基清除活性较高,菌株KF2-6和RG-1的还原能力较强;采用双层琼脂扩散法测定8株乳酸菌的抑菌性能,结果表明:菌株KF2-6和RG-1对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌抑制效果均较好。综上,菌株KF2-6和RG-1的益生特性较好。之后对2株菌进行安全性评价,结果发现2株菌对红霉素、卡那霉素、氯霉素和四环素敏感,对头孢噻肟和万古霉素耐药。2株菌在哥伦比亚血琼脂平板培养后均无溶血现象。(3)乳酸菌发酵麦芽汁和糙米汁饮料的研究以pH和活菌数为指标,通过单因素和响应面优化发酵工艺,选出最佳的工艺条件为:接种量10~6 CFU/m L,培养温度33℃,麦芽汁:糙米汁=1:1,糖度10°Bx。乳酸菌发酵麦芽汁和糙米汁后通过高效液相色谱法研究发现发酵液中乳酸的含量增加最多,同时有少量乙酸和丁酸产生。研究发现丝氨酸、精氨酸、甘氨酸和半胱氨酸的含量都有不同程度的增加,其余氨基酸含量都呈现减少趋势。采用顶空固相微萃取结合气质联用分析发酵液中的挥发性化合物,结果发酵后挥发性化合物种类明显增加,其中酸类和酯类化合物的种类增加较多。醇类和酸类含量增加幅度较大,醛类化合物含量下降幅度较大。
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