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目的:鸟嘌呤核苷酸解离抑制因子2(Rho GDPdissociation inhibitor2,RhoGDI2)通过调节Rho鸟苷三磷酸酶(Rho GTPases)蛋白家族的分布及活性状态,从而调控着细胞分裂、细胞形态改变、细胞迁移、囊泡运输、基因表达等过程。目前发现RhoGDI2在多种肿瘤中存在着异常表达,RhoGDI2通过多种机制调控肿瘤的侵袭与转移,被认为是一个肿瘤转移相关基因。然而RhoGDI2在胰腺癌中的表达及相应作用,却缺乏相应的实验研究,本实验旨在探讨RhoGDI2在胰腺癌组织标本中的表达及其临床意义,研究RhoGDI2在胰腺癌细胞株中的表达及其对胰腺癌细胞增殖、迁移、侵袭等生物学行为的影响,并寻找RhoGDI2调控的下游分子。方法:(1)利用免疫组化技术检测RhoGDI2在60对胰腺癌组织和相应癌旁组织中的表达,并分析RhoGDI2的表达与临床病理因素的关系;(2)利用RT-PCR和Western blot检测RhoGDI2和MMP2在30对新鲜胰腺癌组织及癌旁组织中的表达情况,分析两者表达的相关性。(3)利用RT-PCR和Western blot检测RhoGDI2在胰腺癌细胞株PANC-1、BxPC3、SW1990、Patu8988中的表达情况,将siRNA-RhoGDI2或siRNA-NC转染到胰腺癌细胞株中,利用RT-PCR和Western blot确认RNAi靶向沉默RhoGDI2的效果。(4)沉默RhoGDI2表达后,利用体外增殖实验(CCK-8法)、伤口愈合实验和侵袭实验检测胰腺癌细胞增殖能力、迁移能力和侵袭能力的改变(5)沉默RhoGDI2表达后,利用RT-PCR和Western blot技术检测各组胰腺癌细胞中MMP2的表达情况。结果:(1)RhoGDI2在胰腺癌组织中的mRNA表达量明显高于相应癌旁组织,RhoGDI2的mRNA相对表达量分别为0.661±0.021、0.199±0.023(P<0.05);免疫组化结果显示,RhoGDI2在胰腺癌组织中的阳性率明显高于癌旁组织(P<0.05)。RhoGDI2的表达与临床病理因素的分析结果显示,RhoGDI2的表达与肿瘤大小、分化程度、肿瘤分期、淋巴结转移及血管侵犯密切相关(P<0.05),而与性别、年龄、肿瘤部位无关(P>0.05)。(2)不论是mRNA还是蛋白质水平,RhoGDI2和MMP2在胰腺癌组织中的表达都明显高于相应癌旁组织(P<0.05),Spearman相关分析数据显示,RhoGDI2表达与MMP2的表达正相关(P<0.001),在mRNA和蛋白质水平的Spearman相关系数分别为0.627、0.817。(3) RhoGDI2在PANC-1和Patu8988中表达,而在BxPC3和SW1990中不表达;RNAi技术沉默RhoGI2在PANC-1和Patu8988中的表达,蛋白抑制率分别为78.3%和82.4%。(4)沉默RhoGDI2在PANC-1和Patu8988中的表达后,PANC-1和Patu8988细胞的增殖能力无明显改变(P>0.05,P>0.05),迁移和侵袭能力明显下降(P<0.05,P<0.05)(5)沉默RhoGDI2在PANC-1和Patu8988中的表达后,与阴性对照组相比,MMP2在PANC-1和Patu8988实验组中的表达明显受抑制(P<0.05,P<0.05)。结论:RhoGDI2和MMP2在胰腺癌中高表达,两者表达正相关,RhoGDI2的表达与肿瘤大小、分化程度、肿瘤分期、淋巴结转移及血管侵犯密切相关。沉默RhoGDI2的表达后,胰腺癌细胞的迁移、侵袭能力明显下降,并抑制MMP2在胰腺癌细胞中的表达。RhoGDI2可以作为人体胰腺癌进展的标志物,是一个潜在的治疗靶点。