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目的:观察miR-215-5p对表皮细胞增殖的影响和调控;建立银屑病小鼠模型,观察miR-215-5p对银屑病小鼠模型的影响,观察麻防犀角地黄汤干预银屑病小鼠模型后对miR-215-5p表达、皮肤组织氧化应激、炎性因子、相关信号通路的影响,探讨麻防犀角地黄汤治疗银屑病的作用机制,为临床用药提供参考依据。方法:1.用50ng/ml的IL-6、IL-22、IL-17A处理HaCaT细胞,利用qRT-PCR检测miR-215-5p表达变化;在HaCaT细胞中转染miR-215-5p mimic,利用qRT-PCR检测miR-215-5p表达变化,CCK-8实验测定细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期,Edu染色方法测定细胞增殖;生物信息学软件预测miR-215-5p和DYRK1A的3’UTR有site1和site2共2个互补结合位点,利用荧光素酶报告系统鉴定二者的靶向关系;在HaCaT细胞中转染miR-215-5p mimic,qRT-PCR方法测定DYRK1A mRNA表达变化,Western blot检测DYRK1A,EGFR、AKT、p-AKT、ERK、p-ERK蛋白表达变化;用IMQ诱导构建银屑病小鼠模型,皮下注射miR-215-5p agomir,观察小鼠皮肤病变情况,进行PASI评分,qRT-PCR方法测定miR-215-5p表达变化,HE染色观察皮肤组织病理变化,免疫组化测定皮肤组织中Ki67表达情况,qRT-PCR检测DYRK1A mRNA表达变化,Western blot检测DYRK1A、EGFR、AKT、p-AKT、ERK、p-ERK蛋白表达;2.IMQ诱导构建银屑病小鼠模型,给予麻防犀角地黄汤灌胃治疗,检测各组小鼠体重并观察皮损情况,行PASI评分,测定耳廓外缘的厚度,采用HE染色法观察皮肤病理变化情况,qRT-PCR方法测定皮肤组织中miR-215-5p表达水平;3.IMQ诱导构建银屑病小鼠模型,给予麻防犀角地黄汤灌胃治疗,取皮肤组织,分别用GSH测定试剂盒、CAT测定试剂盒、MDA测定试剂盒、SOD测定试剂盒检测GSH、CAT、MDA、SOD的含量或活性;4.IMQ诱导构建银屑病小鼠模型,给予麻防犀角地黄汤灌胃治疗,取皮肤组织,qRT-PCR检测TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-17A、IL-22 mRNA水平,ELISA方法测定TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-17A、IL-22含量,Western blot检测IκB、p-IκB、p65、p-p65、JNK、p-JNK、ERK、p-ERK、p38、p-p38蛋白水平。结果:1.IL-6、IL-22、IL-17A处理后的HaCaT细胞中miR-215-5p表达水平降低。转染miR-215-5p mimic后的HaCaT细胞中miR-215-5p表达水平升高,细胞增殖能力降低,G1期细胞比例升高,S期比例降低。miR-215-5p和DYRK1A互为靶向关系。转染miR-215-5p mimic后的HaCaT细胞中DYRK1A mRNA和蛋白表达水平降低,EGFR、p-AKT、p-ERK蛋白表达水平也降低,AKT、ERK蛋白表达水平没有明显变化。IMQ银屑病小鼠模型复制成功,皮损明显,鳞屑增多,PASI评分升高,皮肤组织中表皮棘细胞层明显增厚,有明显的炎性细胞浸润,Ki67阳性细胞数目增多,DYRK1A mRNA和蛋白水平均升高,EGFR、p-AKT、p-ERK蛋白水平也升高,AKT、ERK蛋白表达水平没有明显变化;皮下注射miR-215-5p agomir后的银屑病模型小鼠皮损明显改善,PASI评分降低,皮肤组织中表皮棘细胞层厚度减小,炎性细胞浸润减少,Ki67阳性细胞数目减少,DYRK1A mRNA和蛋白水平降低,EGFR、p-AKT、p-ERK蛋白水平也降低,AKT、ERK蛋白表达水平没有明显变化。2.银屑病模型小鼠体重明显降低,小鼠皮肤表面红斑、鳞屑明显,PASI评分升高,耳廓外缘厚度增加,皮肤组织表皮厚度增加,炎性细胞浸润增加,皮肤组织中miR-215-5p表达水平降低;麻防犀角地黄汤灌胃治疗后的银屑病模型小鼠体重升高,小鼠皮肤表面红斑、鳞屑改善,PASI评分下降,耳廓外缘厚度减少,皮肤组织表皮厚度和炎性细胞浸润均明显改善,皮肤组织中miR-215-5p表达水平升高。3.银屑病模型小鼠皮肤组织中SOD活性降低,MDA含量升高,GSH含量降低,CAT活性降低;麻防犀角地黄汤灌胃治疗后的银屑病模型小鼠皮肤组织中SOD活性升高,MDA含量降低,GSH含量升高,CAT活性升高。4.银屑病模型小鼠皮肤组织中TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-17A、IL-22mRNA和含量均升高,p-IκB、p-p65、p-JNK、p-ERK、p-p38蛋白水平也升高,IκB蛋白水平下降;麻防犀角地黄汤灌胃治疗后的银屑病模型小鼠皮肤组织中TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-17A、IL-22 mRNA和含量均下降,p-IκB、p-p65、p-JNK、p-ERK、p-p38蛋白水平也降低,IκB蛋白水平升高。结论:1.miR-215-5p的高表达会靶向抑制DYRK1A并影响EGFR、AKT、ERK等信号通路的激活,抑制表皮细胞增殖和改善银屑病模型小鼠病理状态,miR-215-5p可能是银屑病的保护因子。2.麻防犀角地黄汤可以改善银屑病模型小鼠病理状态、提高生存质量。3.麻防犀角地黄汤可能通过上调miR-215-5p的表达,靶向抑制DYRK1A并影响EGFR、AKT、ERK等信号通路的激活起到治疗银屑病的作用。4.麻防犀角地黄汤可能通过抑制MAPK、NF-κB等信号通路的激活,降低TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-17A、IL-22等炎性因子水平起到治疗银屑病的作用;5.麻防犀角地黄汤可以改善银屑病的氧化应激起到治疗银屑病的作用。