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民族药作为我国传统医药的重要组成部分,越来越受到人们的重视。但藏药千里光的研究开发较落后,药效物质不明确且质量标准不完善。据文献记载藏药千里光分为黑者和白者。白者主要涉及菊状千里光、莱菔叶千里光和川西千里光,在藏医药中应用广泛,其主要含有生物碱类、酚酸类、黄酮类、挥发油类、萜类等化学成分。为了给后续研究提供对照品,本课题选择采集量比较多的莱菔叶千里光开展化学成分研究,并选择其中的3,5-O-二咖啡酰基奎尼酸为指标成分开展质量标准研究,品种则选择采集批次较多的川西千里光为研究对象,建立其质量标准化。川西千里光亦称川西合耳菊,最新研究将其归类于合耳菊属,因此有必要对其进行标准化研究,以规范其应用。采用凝胶柱色谱、低压液相色谱以及制备液相色谱技术对莱菔叶千里光的进行化学成分研究,并用核磁技术与液质技术相结合鉴定了15个化合物,分别鉴定为绿原酸(1)、苯基-β-D-葡萄糖苷(2)、对羟基苯甲酸(3)、2,5-二羟基苯甲酸(4)、jacaranone(5)、对羟基苯乙酸(6)、原儿茶醛(7)、对羟基苯乙酸甲酯(8)、芦丁(9)、3,5-O-二咖啡酰基奎尼酸(10)、邻苯二甲酸正丁酯(11)、油酸酰胺(12)、异鼠李素-3-O-葡萄糖苷(13)、(2R)-1-O-β-D-galactopyranosyl glycerol(4)、4-hydroxy-4-methylenecarbomethoxy-cyclohexa-2,5-dienone(15),其中化合物(2,10,11,13~15)为首次从千里光属植物中分离得到。采用高效液相色谱法,以3,5-O-二咖啡酰基奎尼酸为指标成分,建立其含量测定方法,以乙腈:0.1%甲酸水(14.5:85.5)为流动相,检测波长327nm,流速1.0ml/min,3,5-O-二咖啡酰基奎尼酸在0.0713~1.4260μg范围内,其线性关系良好,回归方程Y=184820X+16771,相关系数R~2=0.9999。利用上述方法对11批次川西千里光中3,5-O-二咖啡酰基奎尼酸的含量进行测定,依据限度规定要求,建立3,5-O-二咖啡酰基奎尼酸含量限度为,每克药材以干燥品计不得少于1.83mg/g。同时依据中国药典质量标准技术指导原则,对11批次川西千里光显微鉴别、薄层鉴别、水分、灰分、酸不溶性灰分和浸出物等进行测定,并依据限度要求,建立相关检查项限度:水分不得高于11.7%、灰分不得高于9.7%、酸不溶性灰分不得高于1.7%和浸出物不得少于24.6%。以上研究内容汇总后形成质量标准草案并起草说明。刺五加Acanthopanax senticosus(Rupr.et Maxim.)Harms为五加科五加属植物刺五加的根、根茎或茎叶,主要分布于中国黑龙江、吉林、辽宁地区,其性温、微苦、味辛。具有益气健脾、补肾安神的功效。本课题组前期对刺五加30%、60%、95%乙醇提取物治疗脑缺血再灌注损伤进行研究,发现60%乙醇洗脱部位药理活性较好。故本实验将对刺五加60%乙醇洗脱部位进行化学成分研究,采用凝胶柱色谱、中低压液相色谱以及高效液相色谱技术进行分离,采用波谱学方法与理化性质相结合鉴定了21个化合物,分别鉴定为异落叶松脂醇(1)、dihydrodehydrodiconiferyl alcohol(2)、苦楝新醇(3)、vanillil(4)、2,3-二氯喹喔啉(5)、1,5-二咖啡酰奎宁酸(6)、原儿茶醛(7)、3-carboxy-6,7-dihydroxy-1-(3′,4′-dihydroxyphenyl)-naphthalene(8)、咖啡酸乙酯(9)、5,6,7-三甲氧基香豆素(10)、大黄素-1-O-β-D-葡萄糖苷(11)、对香豆酸(12)、秦皮乙素(13)、methyl 3,5-dihydroxy-4-methoxybenzoate(14)、异嗪皮啶(15)、(-)-丁香树脂酚(16)、(+)-丁香脂素(17)、反式咖啡酸(18)、大黄素(19)、香草酸(20)、咖啡酸甲酯(21)。其中化合物1、3~5、7~11、13、14为首次从刺五加属植物中分离得到。通过查阅刺五加的相关文献,发现刺五加在治疗脑缺血再灌注损伤有一定的保护作用,其作用机制与抑制炎症细胞因子的过度分泌有关。故对现有的部分单体化合物进行体外抗炎活性的实验。本实验采用LPS诱导小鼠巨噬细胞构建炎症模型,Griess试剂测定其中NO的释放量,从而证明化合物是否具有抗炎活性,研究结果显示,刺五加中化合物异落叶松脂醇(1)、dihydrodehydrodiconiferyl alcohol(2)、苦楝新醇(3)、vanillil(4)、2,3-二氯喹喔啉(5)、1,5-二咖啡酰奎宁酸(6)、原儿茶醛(7)、3-carboxy-6,7-dihydroxy-1-(3′,4′-dihydroxyphenyl)-naphthalene(8)、咖啡酸乙酯(9)、秦皮乙素(10)、异嗪皮啶(11)、(-)-丁香树脂酚(12)、(+)-丁香脂素(13)、反式咖啡酸(14)、大黄素(15)、香草酸(16)、具有显著的抗炎活性,其中化合物vanillil(4)、原儿茶醛(7)活性最好。