【摘 要】
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目的研究miR-345-3p在人乳腺癌（breast cancer,BC）组织和人乳腺癌细胞中的表达情况、功能,并阐明miR-345-3p调控乳腺癌细胞增殖和侵袭的作用机制,以寻找有效的靶点来治疗乳腺癌。方法通过荧光原位杂交（FISH）和实时荧光定量聚合酶链反应（q RT-PCR）分别检测miR-345-3p在乳腺癌组织和细胞中的表达。运用癌症基因组图谱（TCGA）数据库分析miR-345-3p表
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目的研究miR-345-3p在人乳腺癌（breast cancer,BC）组织和人乳腺癌细胞中的表达情况、功能,并阐明miR-345-3p调控乳腺癌细胞增殖和侵袭的作用机制,以寻找有效的靶点来治疗乳腺癌。方法通过荧光原位杂交（FISH）和实时荧光定量聚合酶链反应（q RT-PCR）分别检测miR-345-3p在乳腺癌组织和细胞中的表达。运用癌症基因组图谱（TCGA）数据库分析miR-345-3p表达量与乳腺癌病人总体生存期的关系。体外实验通过脂质体转染miR-345-3p mimics和inhibitors,分别过表达和敲低miR-345-3p,通过划痕实验、Cell Counting Kit-8（CCK-8）实验、transwell实验检测miR-345-3p对乳腺癌细胞增殖和侵袭的影响。体内实验通过构建miR-345-3p敲低慢病毒感染细胞,筛选miR-345-3p敲低的稳转株,皮下注射miR-345-3p敲低的乳腺癌细胞到裸鼠皮下进行成瘤,研究miR-345-3p在体内对乳腺癌发生发展的作用。使用Targetscan、Mi RTar Base、Mi RDB三个数据库预测得到miR-345-3p的靶基因,q RT-PCR、蛋白质印迹、荧光素酶报告基因实验验证miR-345-3p与靶基因的靶向关系,蛋白质印迹验证miR-345-3p对相关信号通路的调控作用。结果与癌旁组织和正常乳腺上皮细胞MCF-10A相比,miR-345-3p在乳腺癌组织和细胞中都显著高表达,且miR-345-3p高表达与乳腺癌病人较差总体生存期呈正相关。体外划痕实验、Cell Counting Kit-8（CCK-8）实验、transwell侵袭实验等功能实验证明miR-345-3p过表达促进乳腺癌细胞增殖和侵袭。体内裸鼠皮下成瘤实验证明,敲低miR-345-3p可以抑制乳腺癌肿瘤的发生发展。蛋白磷酸酶2催化亚基α（PPP2CA）是miR-345-3p的潜在的靶基因,过表达miR-345-3p显著降低PPP2CA的m RNA和蛋白水平,相反,敲低miR-345-3p显著提高PPP2CA的m RNA和蛋白水平。由此可见,miR-345-3p通过靶向PPP2CA（一种AKT磷酸化抑制因子）促进PI3K-AKT信号通路从而促进乳腺癌细胞增殖和侵袭。结论miR-345-3p在乳腺癌组织和细胞中高表达,高表达的miR-345-3p通过靶向PPP2CA（一种AKT磷酸化抑制因子）促进PI3K-AKT信号通路从而促进乳腺癌细胞增殖和侵袭。敲低miR-345-3p可以抑制乳腺癌细胞增殖和侵袭。因此,miR-345-3p有望成为乳腺癌的新的治疗靶点。
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