【摘 要】
：
背景:固相萃取（solid phase extraction,SPE）-高效液相色谱-电化学或质谱法检测血浆或24 h尿甲氧基去甲肾上腺素（Normetanephrine,NMN）、甲氧基肾上腺素（Metanephrine,MN）是临床常用的嗜铬细胞瘤（Pheochromocytomas and Paragangliomas,PPGLs）诊断方法。但固相萃取操作繁琐,处理时间长,并且血浆和24 h
论文部分内容阅读
背景:固相萃取（solid phase extraction,SPE）-高效液相色谱-电化学或质谱法检测血浆或24 h尿甲氧基去甲肾上腺素（Normetanephrine,NMN）、甲氧基肾上腺素（Metanephrine,MN）是临床常用的嗜铬细胞瘤（Pheochromocytomas and Paragangliomas,PPGLs）诊断方法。但固相萃取操作繁琐,处理时间长,并且血浆和24 h尿采集不便,不利于在临床推广。目的:1.制备一种磁性分子印迹聚合物（Magnetic molecularly imprinted polymer,MMIP）,并基于合成的MMIP建立一种分散固相萃取-（dispersive solid phase extraction,DSPE）HPLC法测定随机尿样本中的NMN、MN、3-methoxytyramine（3-MT）和肌酐（creatinine,Cr）。2.用建立的方法测定PPGLs患者和对照组随机尿NMN、MN、3-MT和Cr,并探讨其对PPGLs的诊断效能,寻找一种简便、灵敏的诊断PPGLs的新方法。方法:1.采用多巴胺（Dopamine,DA）为模板,甲基丙烯酸为功能单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂,偶氮二异丁腈为引发剂在有氧条件下合成MMIP,使用索氏抽提对MMIP进行洗脱。将500.0μL随机尿样本和40.0 mg MMIP加入2.5 m L 0.1mol/L磷酸盐缓冲液（p H=9.0）,室温涡旋1.0 min,吸附7.0 min后磁分离。加入1.0 m L超纯水清洗,弃上清,再用400.0μL 2.0%醋酸溶液在30.0℃水浴条件下洗脱8.0min,磁分离后取20μL上清液进行HPLC-荧光/紫外检测。2.采用SPE和DSPE分别对PPGL患者（n=18）和正常对照组（n=22）随机尿样本进行处理,探讨两种预处理方法的一致性。3.采用所建立的方法测定37例PPGLs患者和65例对照组（14例其他肾上腺占位患者、7例原发性高血压患者、24例其他疾病患者和20例健康对照）随机尿NMN、MN和Cr的峰面积（A）,用受试者工作曲线,评价ANMN/ACr和AMN/ACr对PPGLs的诊断效能。结果:1、在模板,功能单体,交联剂比例为1:7:7时,MMIP对于MN和3-MT标准品的吸附洗脱效果较好（吸附效率均≥97.2%,洗脱效率均≥79.0%）。2、采用DSPE法对随机尿样品进行预处理耗时20 min。所建立的方法日内变异系数均≤6.2%,日间变异系数均≤7.8%;平均回收率在97.2%-103.5%之间。DSPE和SPE法测得的ANMN/ACr和AMN/ACr相关性良好（R＞0.95,P＜0.05）。3.随机尿ANMN/ACr和AMN/ACr对于PPGLs诊断效率分别为0.973和0.852,与血浆NMN和MN的诊断效率（0.949和0.863）相似。结论:建立的DSEP-HPLC-FLD/UVD法检测随机尿样本中的NMN、MN和Cr,用ANMN/ACr和AMN/ACr诊断PPGLs,简便、快速、诊断效率高,具有良好的临床应用前景。
其他文献
PEAK1（Pseudopodium enriched atypical kinase 1）是在细胞伪足中被鉴定到的、酪氨酸残基高度磷酸化的蛋白,近年来的研究表明PEAK1在多种转移肿瘤中高表达,能促进多种肿瘤细胞迁移,但PEAK1是否参与调控紧密连接的形成及排列未见报道。我们构建了PEAK1敲除鼠,结果发现敲除鼠对4 KD FITC-Dextran的通透性增加。组织免疫荧光,透射电镜结果以及Ca
作为一种内源性非编码小分子RNA,microRNA（mi RNAs）在细胞中表达水平的变化与疾病的发生、发展息息相关,因此对细胞内mi RNAs分子进行原位成像研究对细胞的异质性分析以及疾病的分子机制探究具有重要意义。受限于mi RNAs序列短、同源性高、丰度低等自身不足,mi RNAs的原位检测仍面临着巨大的挑战。局域化DNA纳米技术在检测细胞内mi RNAs方面展现出了较快的反应速度和高灵敏度
第一部分ITIH5在3T3-L1细胞及各种肥胖模型小鼠脂肪组织中的表达目的:探索ITIH5在C57小鼠各组织中分布情况,检测ITIH5在脂肪组织与脂肪细胞中的表达水平。方法:采用RT-QPCR检测ITIH5在C57（C57BJ/6L）小鼠下丘脑、肝脏、脂肪、肌肉、心脏等组织中的m RNA表达水平,免疫组织化学染色（IHC）检测ITIH5在脂肪细胞中的定位,RT-QPCR和western blot检
目的:探讨白藜芦醇（Resveratrol,RES）对钙盐诱导的猪瓣膜间质细胞（porcine valve interstitial cells,p VICs）成骨样分化的作用和机制,为钙化性主动脉瓣膜疾病（Calcific aortic valve disease,CAVD）的临床药物治疗和预防提供理论依据。方法:通过免疫组织化学染色检测正常人和CAVD患者主动脉瓣膜组织中成骨标志物Runt相关
目的:探讨鼻腔钮扣式电池异物对鼻腔黏膜的损害及其治疗方法。方法:总结13例钮扣式电池鼻腔异物患者的资料,所有患者取出异物后均在鼻内镜下行鼻腔仔细清理及冲洗,受损黏膜表面覆帖涂有红霉素眼膏的明胶海绵。结果:13例患者中,10例术后恢复良好,未见明显并发症;2例患者出现鼻腔粘连;1例患者术后发生鼻中隔穿孔。结论:一旦发现异物为钮扣电池应尽快取出,术中仔细清理术腔,术后系统用药,最大程度避免鼻出血、鼻中
目的:本研究利用CBCT评估青少年双颌前突患者拔除第一前磨牙内收前牙后上下颌前牙区牙槽骨的改建情况,尤其是保持阶段的牙槽骨修复情况,以了解青少年正畸患者的骨改建的能力,为临床上青少年双颌前突患者矫治方案的设计提供一定的科学依据与临床参考。材料和方法:从重庆医科大学附属口腔医院正畸科治疗结束十八个月以上且有定期随访资料的双颌前突青少年患者中,筛选出34例符合纳入标准的患者,收集其正畸治疗前（T1期）
目的:慢性髓细胞白血病（Chronic Myeloid Leukemia,CML）是由造血干细胞异常增殖分化以及肿瘤性转化所引起的。t（9;22）（q34;q11）易位后所编码的BCR/ABL蛋白是其发生发展的标志性蛋白。针对BCR/ABL激酶区设计的一线药物伊马替尼（Imatinib,IM）取得了良好的效果,但其耐药或不耐受使得部分CML患者无法完全治愈。课题组前期发现在耐药的细胞中BCR/AB
肾脏发育过程中发挥重要作用的转录因子SIX2在肾癌中被异常激活对于肾癌的发生发展具有重要的作用。在肾癌中,SIX2表达量的异常升高能够通过增强肾癌细胞的迁移和侵袭能力来促进肾癌的转移。然而,目前对于SIX2的上游调控及核定位机制仍不明确。在本次研究中,我们首先通过生信分析发现SIX2在肾癌发挥重要作用。随后在多个病人肾癌样本和细胞样本中发现SIX2的核内定位增加。通过分析预测SIX2的核定位信号进
MicroRNA（miRNA）是生物体内具有调控功能的一类非编码RNA,长度为18～24 nt,其异常表达与肿瘤的发生发展息息相关,因而可以作为疾病诊断和预后判断的生物标志物。然而,目前miRNA的分析方法主要依赖于逆转录实时定量聚合酶链式反应（Reverse transcriptase-polymerase chain reaction,RT-PCR）,存在费时、假阳性、样本易丢失等缺点。为了克
DNA链置换反应在DNA纳米技术中扮演着重要的角色,其在生物传感领域亦有许多应用。在此,本文针对DNA链置换的新机制及其在突变检测中的应用进行了如下研究:首先,本文介绍了一种新型的DNA链置换调节机制——合作分支迁移（Cooperative branch migration,CBM）。CBM通过调节分支迁移域的互补性来控制DNA链置换反应,其与大多数调控工具兼容并可连续微调跨越5个数量级的反应速率