【摘 要】
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纳米颗粒具有多种性质,可作为载体实现多种生物功能。线粒体在生物学角度被认为是细胞应激和细胞内凋亡信号的放大器。当细胞受伤时,线粒体自身应激反应会影响膜刚性。纳米颗粒会影响膜的许多特性,而Langmuir-Blodgett薄膜技术(LB膜技术)可以表征一系列膜理化性质的变化。本研究通过不同方法制备、修饰并表征了小粒径分散性和稳定性良好的Fe3O4纳米颗粒,以LB膜技术将Fe3O4纳米颗粒与单组分薄膜
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纳米颗粒具有多种性质,可作为载体实现多种生物功能。线粒体在生物学角度被认为是细胞应激和细胞内凋亡信号的放大器。当细胞受伤时,线粒体自身应激反应会影响膜刚性。纳米颗粒会影响膜的许多特性,而Langmuir-Blodgett薄膜技术(LB膜技术)可以表征一系列膜理化性质的变化。本研究通过不同方法制备、修饰并表征了小粒径分散性和稳定性良好的Fe3O4纳米颗粒,以LB膜技术将Fe3O4纳米颗粒与单组分薄膜、二元组分混合膜、三元组分混合膜和线粒体内脂膜模型结合,进行理论计算和分析,探究Fe3O4纳米颗粒与线粒体内膜模型的互作方式和互作机理。具体的实验内容和结果如下:(1)Fe3O4纳米颗粒与1-棕榈酰基-2-油酰基-SN-甘油-3-磷酸乙醇胺(POPE)/1-棕榈酰基-2-油酰-SN-甘油-3-磷脂酰胆碱(POPC)/心磷脂(BHCL)脂单层膜相互作用的研究亲水Fe3O4纳米颗粒与POPE和POPC单层膜分子间存在静电作用,在亚相中结合在了极性头部;与BHCL单层膜分子间存在静电排斥;疏水Fe3O4纳米颗粒与POPE和POPC单层膜分子间存在静电作用和疏水作用,在界面上结合在了极性头部;与BHCL单层膜分子间主要存在疏水作用,结合在了疏水尾链上,二者之间的疏水作用和范德华力大于静电排斥作用。(2)Fe3O4纳米颗粒与混合POPE/POPC单层膜相互作用的研究Fe3O4纳米颗粒在与混合POPE/POPC单层膜相互作用力为静电作用。Fe3O4纳米颗粒分子随着时间的推移不断地吸附到单层膜上,且Fe3O4纳米颗粒浓度越大,吸附作用越显著。与亲水Fe3O4纳米颗粒相比,疏水Fe3O4纳米颗粒对混合POPE/POPC单层膜的吸附作用更强,这是因为静电吸附的加持使得疏水Fe3O4纳米颗粒对混合POPE/POPC单层膜的吸附作用更强。(3)Fe3O4纳米颗粒与混合POPE/POPC/胆固醇(Cholesterol,Chol)单层膜相互作用的研究Fe3O4纳米颗粒通过静电作用和范德华力与脂质单分子膜结合。在Chol存在下,崩溃压比起混合POPE/POPC单层膜提高说明Chol增加了混合膜的稳定性。疏水Fe3O4纳米颗粒带电性比亲水的更强,可与混合POPE/POPC/Chol单层膜分子间产生静电作用和范德华作用力。疏水Fe3O4纳米颗粒比亲水Fe3O4纳米颗粒所携带的电荷更多,静电吸附的加持使得疏水Fe3O4纳米颗粒对混合POPE/POPC/Chol单层膜的吸附作用更强。过量平均分子面积和过量吉布斯自由能的值为负,表明分子之间的相互作用是吸引相互作用,存在吸引力。(4)Fe3O4纳米颗粒与线粒体内脂膜模型相互作用的研究Fe3O4纳米颗粒可与IMM单层膜分子间产生静电作用和范德华作用力。疏水Fe3O4纳米颗粒比亲水Fe3O4纳米颗粒所携带的电荷更多,静电吸附的加持使得疏水Fe3O4纳米颗粒的吸附作用更强。过量平均分子面积和过量吉布斯自由能的值为正,表明IMM的四种分子之间的相互作用是排斥相互作用。疏水Fe3O4纳米颗粒的加入增强了 IMM单层膜的排斥作用,且随着浓度的增加其相互排斥作用也越强,程度大于亲水Fe3O4纳米颗粒,因为负电性更强的疏水Fe304纳米颗粒与带负电的BHCL和Chol脂质分子之间的相互作用可以进一步加强了其相互排斥。通过以上研究,利用LB膜技术将Fe3O4纳米颗粒与线粒体内脂膜模型结合,可对Fe3O4与线粒体内脂膜模型的互作从一元、二元、三元的整个过程有较为全面的研究。以实验数据为基础,通过理论计算和分析,推测Fe3O4纳米颗粒与线粒体膜模型的相互作用方式和可能的机制,为细胞膜系统和线粒体应激、线粒体疾病等的相关研究提供一定的理论支撑。
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