【摘 要】
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荧光分子成像技术由于其廉价、简单方便、灵敏度高、重复性好等优点,因而在疾病诊断领域成为了人们关注的重点,尤其近红外荧光成像,已经成为肿瘤手术术中实时的影像导航手段。荧光探针作为荧光成像技术中的核心组成,无疑是影响荧光影像清晰度和分辨率的决定性因素,一个优异的用于荧光成像的荧光探针需要具备波长合适、量子产率高、光稳定性好、生物相容性好等优点。在肿瘤手术术中,需要对肿瘤组织区域进行长时间的实时跟踪成像
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荧光分子成像技术由于其廉价、简单方便、灵敏度高、重复性好等优点,因而在疾病诊断领域成为了人们关注的重点,尤其近红外荧光成像,已经成为肿瘤手术术中实时的影像导航手段。荧光探针作为荧光成像技术中的核心组成,无疑是影响荧光影像清晰度和分辨率的决定性因素,一个优异的用于荧光成像的荧光探针需要具备波长合适、量子产率高、光稳定性好、生物相容性好等优点。在肿瘤手术术中,需要对肿瘤组织区域进行长时间的实时跟踪成像,也就意味着荧光探针需要面对长时间不间断的高强度激发光照射,因而荧光成像对于荧光探针的光稳定性提出了很高的要求。目前为止,有机小分子荧光染料及其衍生物依然是最为常用的荧光探针,而绝大多数的小分子荧光探针往往受制于较差的光稳定性,因而无法得到更为深入的应用。本文选用了被FDA和CFDA同时批准可以应用于临床的荧光成像染料荧光素,探索一种可以有效提高小分子荧光探针光稳定性的方法。嵌段共聚物纳米体系是上个世纪末发展起来的新型纳米体系,在化学检测、药物传递、肿瘤治疗等领域有着非常广泛的应用。通过两亲性的嵌段共聚物如PEG-PCL、POX在水相中组装成纳米粒子,可以将载荷包裹在纳米粒子内核中,再利用实体瘤的高通透性和滞留效应可以实现载荷对于肿瘤组织的被动靶向。在本文的第二章针对小分子荧光探针光稳定性差的缺陷,提出了一种利用两亲性嵌段共聚物包覆荧光素形成纳米结构来提高荧光素探针光稳定性的方法,并对PEG-PCL和POX这两种不同的嵌段共聚物对于荧光素光稳定性的影响进行了探究。结果表明,PEG-PCL和POX两种不同的嵌段共聚物在水相中都能组装成均匀稳定的球形纳米粒子,在包覆上荧光素后纳米粒子的尺寸在50nm左右,都能较好的提升小分子荧光素的光稳定性,可以将荧光素的光氧化反应半衰期提高数倍。研究还显示,这种单纯的物理包覆有着自身的局限性,就是会发生纳米粒子内核中荧光素的自淬灭,造成纳米探针极低的荧光量子产率。目前提升小分子荧光探针光稳定性的方法主要有三种:化学修饰,形成衍生物;结构修饰,用特定的结构包覆反应活性位点;形成纳米结构。本文的第二章探究了嵌段共聚物纳米结构对于小分子荧光素光稳定性的影响,第三章则将后面两种方法结合,利用特定的结构(PCL纳米绝缘层)单分子包覆小分子荧光素,进而与嵌段共聚物组装成纳米结构,以此来提高小分子荧光素探针的荧光量子产率以及光稳定性。在第三章中主要探究了纳米探针的量子产率以及光稳定性与PCL纳米绝缘层包覆厚度的关系。结果表明,用PCL纳米绝缘层包覆荧光素后,纳米探针的荧光量子产率得到了极大的提高,包覆后纳米探针的量子产率甚至可以达到0.75。这一方法成功解决了嵌段共聚物荧光素纳米探针自淬灭严重,量子产率低的缺陷;纳米探针的光稳定性也有着较大程度的提升,纳米绝缘层厚度极高的纳米粒子的半衰期可比包覆前的纳米粒子延长近30倍,比小分子荧光素延长近60倍。
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