胡芦巴化学成分含量测定及对酒精性脂肪肝大鼠的作用

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目的:对不同胡芦巴提取物中胡芦巴碱、薯蓣皂苷元进行含量测定,建立高效液相法测定胡芦巴提取物中薯蓣皂苷元含量的方法;研究不同胡芦巴提取物对DPPH及羟基自由基(·OH)的清除效果;观察胡芦巴乙醇提取物对大鼠酒精性脂肪肝(AFL)的治疗作用,并初步探讨其作用机制。方法:采用药典方法测定各提取物中的胡芦巴碱;薯蓣皂苷元的含量测定:色谱柱为大连伊力特Hypersil ODS-1(4.6×250mm,5μm),流动相为甲醇:水(86:14,v/v),流速1.0ml/min,检测波长203nm,柱温35℃;紫外法测定体外抗氧化作用;采用高脂饲料喂养和酒精灌胃结合的方法建立SD大鼠AFL模型,病理检查结果显示造模成功后,用生理盐水做空白对照,水飞蓟宾胶囊和胡芦巴总皂苷(TFGs)做阳性对照,给予胡芦巴乙醇提取物。给药四周后处死大鼠,制备血清、肝匀浆,取肝组织做病理检查。测定并比较各组间血清甘油三醋(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、总胆红素(TBili);比较各组间天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ATL);比较各组间肝脏脂质含量;酶联免疫(ELISA)法测定并比较各组间超氧化物歧化酶(SOD)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、脂联素(adiponectin)及磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)水平;计算并比较各组肝指数。结果:薯蓣皂苷元的色谱峰面积与浓度呈良好的线性关系,线性范围为43.2μg/ml~864μg/ml(r=0.9995),平均回收率(n=9)为100.3%;胡芦巴各提取物对DPPH和羟基自由基(·OH)有明显的清除效果;胡芦巴乙醇提取物能显著改善AFL大鼠肝细胞脂肪变性,显著降低AFL大鼠血清TG、TC、LDL-C(P<0.01)水平,胡芦巴乙醇提取物能显著降低AFL大鼠AST(中剂量P<0.01)、ALT(小剂量P<0.05,中、大剂量P<0.01)水平,胡芦巴乙醇提取物能显著降低AFL大鼠肝脏中TC、TG含量(P<0.01),胡芦巴乙醇提取物能降低肝指数(P<0.05),TFGe能显著降低AFL大鼠血清TNF-α水平(P<0.01),升高血清adiponcetin(P<0.01)、SOD(大剂量组P<0.01)、AMPK水平(大剂量组P<0.01)。结论:采用HPLC法测定胡芦巴提取物中薯蓣皂苷元的含量,该方法准确可靠、重现性好,可用于含量测定;胡芦巴各提取物具有清除DPPH和羟基自由基的作用;胡芦巴乙醇提取物能明显改善AFL大鼠肝脏肿大状况,改善肝组织脂肪变,减少肝脏脂质沉积,胡芦巴乙醇提取物具有降低血脂,降酶保肝的作用。
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