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目的观察石斛合剂序贯方对糖尿病肝损伤及肝纤维化大鼠肝组织JAK2/STAT5/PPARy信号通路相关蛋白及基因表达的影响,为石斛合剂序贯法防治糖尿病合并肝损伤及肝纤维化提供实验依据。方法Wistar大鼠(体重200g左右,SPF级,雌性)60只,适应性喂养1周后,随机分为正常组10只和造模组50只。正常组予普通饲料喂养,造模组予高糖膳食饲料喂养4周后,腹腔注射2次STZ(25 mg/kg+m2,间隔72h),随机选取T2DM成模的大鼠30只随机分为模型对照组、二甲双胍组、石斛合剂序贯组各10只并腹腔注射ConA(12.5mg/kg, qw),正常组注射磷酸盐缓冲液,9周后停止腹腔注射。各组统一于T2DM成模分组后第3天灌胃,每周称重1次,根据体重调整灌胃药量。于灌胃后22周末取材,肝组织行Masson和HE染色、免疫组化测肝组织PPARy表达量,qPCR和Western blot检测大鼠肝脏CollagenI、JAK2和STAT5、RXRα、PPARy的蛋白及mRNA相对表达量。结果1大鼠一般情况观察：整个实验过程中因造模死亡大鼠1只。正常组实验大鼠一般状况良好。各造模组一般情况较差,在药物治疗后,一般情况较前好转。2大鼠空腹血糖变化：药物干预前,与正常组比,模型组、二甲双胍组及石斛合剂序贯组的空腹血糖均显著升高且>11.1mmol/L(P<0.01),模型组、二甲双胍组及石斛合剂序贯组每两组之间空腹血糖无差异(P>0.05)；药物干预后,与模型组比,石斛合剂序贯组的空腹血糖显著降低(P<0.01)。3大鼠肝功能变化：药物干预前,与正常组比,模型组、二甲双胍组及石斛合剂序贯组AST、ALT均明显升高(P<0.05)；模型组、二甲双胍组及石斛合剂序贯组每两组之间AST、ALT无差异(P>0.05)。药物干预后,与模型组比,石斛合剂序贯组的ALT、AST明显降低(P<0.01)。4大鼠血清透明质酸、层粘连蛋白变化：药物干预后,与正常组比,模型组的HA、LN显著升高职0.01)；与模型组比,石斛合剂序贯组的HA、LN均下降(P<0.05),与正常组比,石斛合剂序贯组的HA较高(P>0.05)。5大鼠肝组织Masson染色：正常组仅有少量胶原蛋白表达于中央静脉壁及汇管区。模型组肝组织汇管区及周围可见大量胶原纤维沉积。与模型组相比,石斛合剂序贯组和二甲双胍组的汇管区胶原沉积显著减少。6大鼠肝组织PPARγ免疫组织化学：与模型组比较,正常组PPARγ蛋白阳性着色呈细胞核均匀深棕色,在肝组织中分布较广泛；模型组的细胞核基本未出现阳性着色；石斛合剂序贯组细胞较模型组明显增多,但较正常组细胞的阳性着色较浅。7大鼠肝组织JAK2、STAT5、PPARγ mRNA的表达：药物干预后,与正常组比,模型组JAK2、STAT5、PPARγ表达显著下降(P<0.01)；与模型组比,石斛合剂序贯组的JAK2、STAT5、PPARγ表达升高(P<0.05)。8大鼠肝组织JAK2、STAT5、RXRα、PPARγ的蛋白表达：与正常组比,模型组的CollagenI的表达量升高(P<0.05),T-JAK2、T-STAT5、P-STAT5、PPARγ、RXRα的表达量降低(P<0.05),P-JAK2表达量下降,但差异无统计学意义(P>0.05)；与模型组比,石斛合剂序贯组CollagenI表达量显著下降(P<0.01)；石斛合剂序贯组T-JAK2、P-STAT5、RXRα的表达量显著升高(P<0.01)。结论1 DMOC可改善高脂高糖+STZ联合ConA的糖尿病合并肝损伤及肝纤维化模型大鼠的血糖水平；2 DMOC可改善高脂高糖+STZ联合ConA的糖尿病合并肝损伤及肝纤维化模型大鼠功能指标ALT、AST,肝纤指标HA、LN；减轻大鼠肝脏的胶原蛋白沉积；3 DMOC可能通过上调JAK2/STAT5/PPARy的表达量,改善糖尿病大鼠的肝损伤及抗肝纤维化。