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兜兰属(Paphiopedilum)植物花色丰富、花型奇特,具有较高的观赏价值,也因生境的破坏和人为过度采集,野生兜兰种群受到巨大威胁。兜兰属植物的种子缺少胚乳,在自然条件下必须有特定真菌为其提供营养才能萌发,目前兜兰属植物的繁殖多采用非共生萌发的方法,但是无菌萌发得到的幼苗出瓶后成活率低,难用于野外回归和规模化人工繁育。因此,本研究选取了红旗兜兰(Paphiopedilum charlesworthii)、同色兜兰(Plconcolor)、硬叶兜兰(Pmicranthum)和杏黄兜兰(Parmeniacum)4种兜兰属植物作为研究对象,通过野外采集根样,观察野生成年兜兰植物菌根的形态与结构,通过菌丝团分离法、形态学观察与ITS序列比对相结合的鉴定手段,分析了兜兰属植物菌根真菌的多样性。通过原地萌发和室内共生萌发试验,探讨了兜兰与菌根真菌共生的专一性关系,并筛选出可用于红旗兜兰和同色兜兰共生萌发的有效真菌。通过共生培养和石蜡切片观察的方法,验证并探究菌根真菌对红旗兜兰无菌组培苗生长发育的影响。主要结果如下:1.4种兜兰属植物均具有典型的单子叶植物根的基本结构,根部皮层细胞中都分布着菌根真菌形成的“菌丝团”结构,半附生于石上的同色兜兰、红旗兜兰与硬叶兜兰、杏黄兜兰相比根系较长,含菌丝团的皮层细胞的层数较多。2.分离鉴定得出4种兜兰的菌根真菌共涉及9个科和1类未知担子菌,其中毛壳菌属(Chaetomium)、镰刀菌属(Fusarium)和胶膜菌科(Tulasnellaceae)真菌的分离频率较高,兜兰菌根真菌的多样性与其生境环境有关。3.野外原地萌发试验结果显示,兜兰种子在野外萌发率极低,萌发困难。3种兜兰种子(红旗兜兰、同色兜兰、硬叶兜兰),在贵州兴义原地共生萌发10个月后,除红旗兜兰有少量萌发,萌发率约为0.139%,其他兜兰种子均未萌发。4.室内共生萌发试验结果显示,登录号为FJ786676的胶膜菌科真菌能促进红旗兜兰和同色种子萌发发育至第2阶段。5.将菌根中分离得到的不同菌株和红旗兜兰组培苗共生培养,结果显示:接种菌根真菌对红旗兜兰组培苗的鲜重增长率、根活性、可溶性糖含量、叶绿素含量有着不用程度的影响,其中胶膜菌科真菌对组培苗的生长促进作用效果显著,并观察到真菌通过通道细胞和破坏根被细胞侵入根部皮层的两种方式。本研究分析并探讨了影响4种兜兰菌根真菌组成的因素,分离到的菌根真菌能够促进红旗兜兰、同色兜兰种子萌发,验证了菌根真菌对红旗兜兰组培苗生长发育的促进作用,并观察到了菌根真菌侵入兜兰根部的两种方式,对于构建红旗兜兰和同色兜兰的共生萌发体系,实现红旗兜兰的菌根化栽培有着重要意义。