论文部分内容阅读
我实验室前期的工作证明了在痘苗病毒天坛株(简称为wtVTT)的DelⅢ和HA基因编码区位点插入外源基因GFP所构建的重组天坛病毒(简称为TTpZCl和TTZCl),不但在体内外源基因GFP可以得到很好的表达,而且重组天坛病毒的毒力得到明显下降。这为wtVTT作为有效的重组病毒疫苗载体提供可能。我们将SARS-CoV的全长Spike基因插入到wtVTT的DelⅢ位点(简称为VTT-S),希望其能成为有效的抗SARS疫苗。然而,无论天坛病毒作为何种重组病毒疫苗载体,我们都必须面对的一个问题是：1980年以前出生的中国人都注射过天坛病毒作为预防天花的疫苗。即在这个数量庞大的群体中,存在着不可忽视的预先免疫原性的影响。如果人体内针对天坛病毒的预先免疫影响了以天坛病毒作为载体的其他种类疫苗发挥效力,那么这种重组天坛病毒还是无法成为有效的疫苗。因此我们设计了一套完整的实验：即在小鼠体内通过注射wtVTT来构建预先免疫的模型,而后再用疫苗VTT-S免疫小鼠,检测VTT-S疫苗的效力是否受到影响。几组对照分别是：naive的小鼠直接注射VTT-S;用同样在DelⅢ位点插入Spike基因的重组痘苗MVA-S病毒(此重组病毒疫苗已经被证明能够为小鼠和猴子模型提供良好的抗SARS侵染的保护)(Chen et al.,2005),分别注射有预先免疫原性的小鼠和naive的小鼠,以和VTT-S的效力进行比较；我们还用TTZC1病毒在小鼠体内构建预先免疫的模型,然后在同上面的方法注射VTT-S和MVA-S,目的是和wtVTT的预先免疫影响进行比较。将几组实验的小鼠血清检测其针对SARS-S蛋白的抗体水平,得到的结论是：wtVTT的预先免疫原性对VTT-S疫苗的影响不太大,在wtVTT通过subc途径预先免疫的情况下,VTT-S可以通过in.和oral途径来较好的发挥效力。而subc途径不是VTT-S发挥效力的良好途径(无论有否预先免疫的影响)。而当wtVTT通过in.或oral途径预先免疫的时候,VTT-S再通过这两个途径免疫,则效果很差。VTT-S在多种免疫途径的情况下都比MVA-S效果好,是更加强有力的疫苗。TTZC1病毒的预先免疫原性的影响比wtVTT略小,且使用更加安全,是更好的天花疫苗。