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取少量健康的自体角膜组织,体外培养扩增后种植于一种生物相容性良好的载体上,形成结构和功能与在体角膜相似的组织工程角膜,移植到患眼,不但解决了角膜供体来源不足的问题而且不存在免疫排斥反应。组织工程化角膜以其低抗源性、来源不受限、可按预先设计塑型、具有生物活性等特征为临床应用提供了广阔的前景。本实验制备猪去细胞角膜基质材料(PACM),对此材料的生物相容性、活体内移植进行观察;进一步研究在体外构建含细胞组织工程角膜基质的方法,并将构建的含细胞组织工程角膜基质进行移植实验。 一、猪去细胞角膜基质材料的制备及其生物相容性检测 用三种不同的方法制备猪去细胞角膜基质材料,以找到一种较理想的制备方法和支架材料:以猪角膜为材料来源,分别用Triton(曲拉通)联合0.25%胰酶、Triton联合DNA-RNA酶、Triton联合0.25%胰酶及DNA-RNA酶消化去细胞,进HE染色、扫描电镜观察;在材料上接种兔角膜基质细胞,进行HE染色观察。 结果:Triton联合0.25%胰酶、DNA-RNA酶消化去细胞方法最佳,时间为4h。经HE染色、扫描电镜观察证实:此方法制备的PACM细胞