大网膜微环境介导的胰岛移植治疗糖尿病的研究

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目前全球有4.25亿糖尿病患者,患病人数正急剧增长,预计到2045年,将会有近7亿的糖尿病患者。糖尿病是一种以高血糖为特征的代谢性疾病,其并发症高达100多种,是目前已知并发症最多的一种疾病,药物治疗很难逆转。这对于国家、社会和家庭无疑造成了严重的经济负担。胰岛移植已被证明是一种有望通过内源性调节胰岛素水平来根治I型糖尿病的方法,为糖尿病的治疗开辟了新的方向。胰岛移植部位的选择和构建适合胰岛生存的体内环境是胰岛移植的关键问题,也是目前国内外的研究热点。本研究通过建立I型糖尿病(Type I diabetes mellitus,TIDM)小鼠模型,观察同种小鼠胰岛细胞移植前后血糖、胰岛功能的变化,探索胰岛细胞分离、纯化、移植的方法及有效性。比较胰岛经不同移植部位(大网膜和肾包膜)移植后血糖水平及生存情况,探讨大网膜是否为一个理想的移植部位。具体研究内容和结果如下:(1)采用胆总管穿刺法将胶原酶灌注进小鼠的胰腺中,发现胰腺膨胀完全,灌注良好。随后切取胰腺并在适当的温度下振荡消化,胰腺被消化成细沙粒状,消化完全;(2)胰岛经密度梯度离心纯化后用双硫腙(dithizone,DTZ)将其染色,在倒置相差显微镜下观察到胰岛细胞被染成猩红色,呈圆形或椭圆形。在体视显微镜下进行手工挑胰岛后,最终获得了高纯度的胰岛细胞;(3)通过胰岛素释放试验和细胞活性鉴定后,结果发现所培养的胰岛细胞都表现出良好的活性,可用于进一步移植;(4)使用血糖仪检测I型糖尿病小鼠模型经大网膜和肾包膜移植后的血糖水平变化,结果发现糖尿病小鼠移植后的血糖水平在两周左右开始稳定并维持正常水平,经大网膜移植前后的平均血糖值与肾包膜组接近;(5)用随机效应模型来分析时间-分组因素的相互作用,结果显示出两组的血糖值与时间之间无显著性差异;(6)通过组织学观察在不同移植部位的胰岛细胞生存良好,无炎性细胞浸润。综上所述,与肾包膜相比,大网膜是一个安全且方便的移植位点,不仅可为胰岛提供足够的空间,在血液供应方面具有优势,并且具有适宜胰岛生长的环境,因此可作为未来研究的理想移植位点,但胰岛的长期生存和功能需要大量的实验验证。
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