番茄（Solanum lycopersicum）作为一年或多年生茄科草本植物,营养价值十分丰富,在我国种植广泛。在番茄生产上,病毒病是为害较为严重的病害之一,发病后防治困难,且易造成巨大的经济损失。目前可侵染番茄的种类病毒较多,主要包括:番茄花叶病毒（tomato mosaic virus,To MV）,烟草花叶病毒（tobacco mosaic virus,TMV）,黄瓜花叶病毒（cucumber mosaic virus,CMV）,番茄黄化曲叶病毒（tomato yellow leaf curl virus,TYLCV）等。Synaptotagmin是一种膜转运蛋白,广泛存在于内分泌及神经细胞上。它是囊泡细胞融合过程中的Ca2+感受器,在蛋白质及膜转运过程扮演着重要的作用,并且在植物拟南芥中发现了该家族的6种亚型,命名为SYTA–F,同时有文献报道其在病毒侵入植物细胞的过程中扮演着重要作用。本实验室前期研究结果表明,通过酵母双杂交实验证明了S.l SYTA与Fd I以及DCL存在互作关系,同时在S.l SYTA异源过表达转基因本氏烟中,发现S.l SYTA与Fd I以及DCL在表达量上呈现一定的规律,本实验将继续围绕三者间蛋白的互作以及表达影响进行下一步探究实验。本文根据S.l SYTA设计序列引物,通过分析S.l SYTA蛋白二级结构特征,构建缺失突变体,利用双分子荧光互补技术（Bimolecular Fluorescent Complimentary,Bi FC）,分析各蛋白互作区域和位点,构建不同荧光蛋白标记的融合蛋白植物表达载体,共表达分析各蛋白的共定位情况,并分析各蛋白共表达时的相互影响情况。探究表明验证S.l SYTA与Fd I和DCL均存在相互作用关系,在共聚焦显微镜下均可观察到黄色荧光。构建的缺失突变体p CV-c YFP-C2A与p CV-n YFP-Fd I、p CV-n YFP-DCL相互作用并发出黄色荧光,而p CV-c YFP-C2B与p CV-n YFP-Fd I、p CV-n YFP-DCL不发出黄色荧光,认为其C2A为S.l SYTA所主要行使功能的结构域,C2B在S.l SYTA蛋白互作中不行使功能。同时通过亚细胞共定位实验可以观察到,S.l SYTA对于Fd I的表达有一定的抑制作用,共表达下很难观察到Fd I发出的荧光,而S.l SYTA对于DCL的表达有相互促进的作用,这与本实验室前期研究结果达成一致,说明S.l SYTA可以通过调节相互作用的蛋白,从而达到促进病毒侵染移动的目的。为明确基因S.l SYTA对番茄Fd I、DCL表达及TMV侵染的影响,我们通过病毒TRV介导的沉默载体TRV:S.l SYTA、TRV:Fd I、TRV:DCL,在Micro-Tom番茄植株中进行基因沉默实验,注射14天后,观察表型并采集叶片提取RNA,实时荧光定量PCR（q RT-PCR）检测S.l SYTA、Fd I、DCL相对表达量,q PCR检测结果表明与对照组相比,处理组S.l SYTA被沉默,差异达到显著水平,Fd I的表达量与对照组相比呈现上升趋势,并且达到显著水平,与S.l SYTA呈现负相关,DCL的表达量与对照组相比呈现下降趋势,并且达到显著差异水平,与S.l SYTA呈现正相关趋势,与S.l SYTA异源过表达转基因本氏烟中的处理结果一致,表明S.l SYTA的基因的表达量对Fd I与DCL有着密切联系。为探求S.l SYTA可能参与的植物防御信号途径,我们对S.l SYTA转基因本氏烟进行了转录组测序,并进行了数据分析,分别从植物病原体互作通路以及植物MAPK（Mitogen-activated protein kinase）信号通路途径中筛选到两个抗病的重要相关基因WRKY 43以及TMV resistance N-like,认为其在病毒侵染植物的过程中具有潜在的重要作用,通过病毒介导的沉默载体TRV:WRKY43和TRV:TMV resistance N-like对本氏烟进行基因沉默,基因沉默后的本氏烟接种TMV后第3、5、7天用手持UV等观察荧光移动情况,观察结果显示,WRKY43基因沉默植株相较于对照组,TMV-GFP在第3天没有表现出明显差异,在第5天和第7天,可以看到略快于对照组,表明WRKY43基因在抗病方面有一定的抑制作用,而TMV resistance N-like基因沉默植株相较于对照组在3天没有明显差异,在第5天和第7天可以看出明显快于对照组,表明该基因在抗病方面的效果较为明显。