【摘 要】
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帕金森病(PD)是一种常见的中枢神经系统变性疾病,黑质致密部多巴胺能神经元选择性变性、缺失是其主要的病理特征,临床上以静止性震颤、运动迟缓、肌张力增高和姿势平衡障碍为主
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帕金森病(PD)是一种常见的中枢神经系统变性疾病,黑质致密部多巴胺能神经元选择性变性、缺失是其主要的病理特征,临床上以静止性震颤、运动迟缓、肌张力增高和姿势平衡障碍为主要表现。
近年来国内外均有研究证实MSC移植治疗PD大鼠有效,但由于目前没有统一的移植标准(如移植部位,移植细胞数目,移植前细胞存活率以及是否添加各种细胞因子等),所报道的治疗效果差异很大,而且所有这些实验结果都是建立在移植前后或与对照组比较得出的结论;缺乏与现有成熟治疗手段的对比,所以其疗效的确切价值尚无法评价。
本研究拟通过基因工程和细胞工程相结合的方法,构建真核表达质粒pcDNA3.1/Nurr1,采用LIPOFECTAMINE2000脂质体介导法将Nurr1基因转染MSC,经G418筛选获得稳定表达的Nurr1-MSC细胞株。探讨在不同细胞因子和诱导剂作用下Nurr1基因对MSC的诱导情况;并将Nurr1-MSC、MSC、VMC和生理盐水(对照组)分别移植PD大鼠纹状体尾状核头部,检测移植术前1周至术后8周PD大鼠行为学变化,高效液相测定纹状体多巴胺及其代谢产物含量,比较不同方法治疗PD模型鼠的疗效,为MSC和Nurr1-MSC的临床潜在应用提供理论和实验依据。研究目的1、探讨在不同细胞因子和诱导剂作用下,过表达Nurr1的MSC是否可以体外分化为神经元或DA能神经元。2、探讨过表达Nurr1的MSC移植到PD大鼠纹状体内的存活,迁移以及体内是否可以分化为多巴胺能神经元。3、以假手术组(对照组)和胎鼠中脑腹侧细胞(VMC)组为参照,观察Nurr1-MSC、MSC移植治疗PD大鼠行为学改善程度,检测脑内纹状体DA及其代谢产物的水平变化,评估Nurr1-MSC、MSC、VMC移植治疗PD大鼠的疗效,探讨Nurr1-MSC、MSC治疗PD的临床潜在应用价值。
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