茶树“信阳10号”生态休眠不同阶段的蛋白质组学研究

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茶树是多年生木本植物,在其生命周期中会不断遭遇到恶劣环境条件,比如寒冷的冬季。已有研究表明,休眠在茶树等多年生植物的越冬过程中起着重要作用,而茶树,由于其市场特性,在保证产量的前提下,越早发芽,越早上市,则可以获得越多的经济效益。因此研究茶树越冬芽的休眠机制,具有重要生物学意义和突出的经济效益。目前关于茶树休眠的研究在转录组方面比较成熟,而蛋白质组学研究还不够深入。本研究对茶树蛋白质组学的基本概念、研究方法及其休眠机制等方面的进展进行综述,并进行高效的蛋白样品制备、质谱技术鉴定和差异表达蛋白分析,印证了茶树休眠的调控过程与基因表达机制的统一性,补充了现有的茶树休眠蛋白质组学的理论研究,为进一步探索植物休眠的代谢通路提供了参考依据。根据前人研究,本实验在2018年10月28日、11月26日和2019年1月28日、2月26日取4组样品。采用Label free定量蛋白质组学技术,研究了茶树生态休眠时期的蛋白质组的变化。共鉴定到蛋白质4599个,其中有3541个蛋白质是共有的。刚进入休眠的11月26日实验组中有61个特有蛋白质,破除休眠的2月26日实验组中有55个独特的蛋白质,这些差异蛋白的数目比之前发现的要多,而它们丰度的增加或减少,很有可能就是芽休眠机制形成的原因。GO富集分析表明催化活性、水解活性、脂质代谢、转移酶活性和高尔基体建成相关蛋白的差异最明显。KEGG富集分析发现黄酮类生物合成和亚麻酸、α-亚麻酸代谢途径的差异,这表明黄酮类生物合成和JA信号途径可能参与了茶树进入生态休眠的过程。实验还发现茶树在休眠期大量的黄酮类物质参与了生物合成。通过KEGG分析,发现差异性蛋白质在黄酮类物质合成的代谢途径中聚集,这些蛋白质包括:查尔酮合酶、柚皮素3-双加氧酶、类黄酮3’-羟化酶、花色素合成酶、黄酮合成酶、无色花青素还原酶,证实茶树休眠时期蛋白质组确实发生了差异性改变。分析蛋白质的网络互作关系发现,2个区域的蛋白质呈现了高度聚集现象,这些高度聚集的蛋白质很可能行使了相似甚至是相同的功能。也有一些蛋白质之间的相互连接度很高,推测这些连接点就是影响整个植物新陈代谢或者信号转导的关键点,但具体的相互作用机制,还有待进一步的研究和挖掘。
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