纤维素是一种有机化合物,在自然界里分布广泛、含量丰富,但是由于其纤维素的结构复杂,因此很难被分解,目前应用的有化学法、物理法和微生物法,生物降解是其中较为可行的无污染的高效途径。粗糙脉孢菌是一种能够分泌纤维素酶,有效降解纤维素的模式真菌。本研究从粗糙脉孢菌突变体库中挑选出10株预测与纤维素酶基因有关的突变体菌株,经筛选得出NCU07340基因编码的蛋白具有纤维素酶活性,根据Neurospora Crassa Database报道的NCU07340基因序列设计引物对该基因进行克隆,得到的NCU07340基因与qa-2.5myc.6HisdH载体进行连接,成功构建出CBH I（外切葡聚糖酶）基因载体qa-2.5myc.6HisdH-NCU07340,该载体具有qa启动子序列、氨苄青霉素基因（Amp）序列、组氨酸3基因（his3）序列,在该载体多克隆位点处的EcoRⅠ和SamⅠ识别位点之间插人了NCU07340片段,分子长度8705bp。将构建成功的载体转化进粗糙脉孢菌组氨酸缺陷型菌株301-6中,通过Western blot检验得到蛋白克隆子。以玉米秆为碳源对过表达菌株所产纤维素酶进行检测,并对胞内酶和胞外酶进行SDS-PAGE电泳,结果表明:过表达菌株表达的蛋白量明显增加,酶活增强,CBH酶活力达到了38.1U/mL与野生型相比增加了11%。将稻壳和稻秆作为培养基中的碳源时,外切葡聚糖酶活力分别达到了29.06U/mL和25.14U/mL。采用硫酸铵沉淀获得过表达菌株产生的纤维素酶,并考察影响酶作用温度、pH、金属离子等因素,结果表明:CBH的最适作用温度为50℃,并且在40℃-50℃之间比较稳定;最适pH值为5.0,且CBH在pH值4-6之间比较稳定;Na⁺、Mg²⁺、Mn²⁺则可以促进CBH的活性。除了CBH之外,还研究了另外两种酶--内切葡聚糖酶（EG）和β-葡聚糖苷酶（BG）的活性,分别为14.35U/mL和38.3U/mL,与WT87-3相比分别增加了1.1U/mL和2.2U/mL,Zn²⁺对内切葡聚糖酶活性的促进作用很明显;Na⁺、Mg²⁺具有促进β-葡聚糖苷酶的酶活性的功能。