氨甲喋呤(MTX),其结构与叶酸及二氢叶酸还原酶抑制剂类似。常用于治疗风湿、肿瘤、炎症和皮肤疾病等。近年来,甲氨蝶呤是治疗儿童急性淋巴细胞性白血病(ALL)的基础药物。它可引起明显幼龄儿童的急性、亚急性和慢性神经毒性。目前其确切机制尚未阐明。本研究揭示了 MTX通过干扰叶酸代谢引起幼年小鼠中枢神经系统(CNS)星形胶质细胞凋亡的潜在机制。本实验采用SulforhodamineB(SRB)法检测细胞增殖,TUNEL细胞凋亡检测试剂盒和流式细胞仪分析细胞凋亡。GFAP,DHFR,PARP和pro-Caspase-3的表达以免疫印迹法进行检测。结果表明MTX对C6细胞和原代星形胶质细胞均具有明显增殖抑制作用,且呈浓度依赖性。MTX可导致小鼠脊髓与脑中星形胶质细胞标记物GFAP表达明显下调。另外,细胞内过表达DHFR或添加外源性叶酸可明显逆转MTX的毒性作用。综上,本研究阐明MTX通过干扰叶酸代谢可引起体内、体外星形胶质细胞凋亡,并提示了补充叶酸可能是减轻临床上由MTX导致的星状细胞毒性的新策略。