沙门菌能够引起多种动物的胃肠道疾病,其包含多种流行性血清型。O-抗原是沙门菌的保护性抗原,其特异性抗体能够有效地清除细菌的感染。本研究通过异源表达O-抗原的策略,构建了三株表达纽波特沙门菌O-抗原的重组鼠伤寒沙门菌疫苗株,并在小鼠模型上评估了这些重组疫苗株的免疫原性和免疫保护效果。1鼠伤寒沙门菌重组株的构建利用Gibson组装法构建表达纽波特沙门菌O-抗原基因簇部分基因（wzx-wbaR-wbaL-wbaQ-wzy-wbaW-wbaZ）的表达质粒pCZ11,将其导入三株鼠伤寒沙门菌突变株SLT19（Δasd）、SLT20（ΔasdΔrfbN）、SLT22(ΔasdΔrfbN?pagL::TaraC P_BAD rfbN)中,得到三株鼠伤寒沙门菌重组株SLT19（pCZ11）、SLT20（pCZ11）、SLT22（pCZ11）。银染和免疫印迹实验表明,SLT19（pCZ11）能够同时表达同源鼠伤寒沙门菌和异源纽坡特沙门菌O-抗原;SLT20（pCZ11）只表达异源O-抗原;阿拉伯糖存在时,SLT22（pCZ11）能够同时表达两种O-抗原,阿拉伯糖不存在时,只表达异源O-抗原。以上结果表明,本研究成功的构建了三株表达异源O-抗原的重组株。2鼠伤寒沙门菌重组株生物学特性研究生物学特性实验结果显示,相较于野生株,三株重组株的运动力和对多黏菌素B的敏感性显著降低,但仍表现了和野生株相当的定殖能力和毒力。以上结果表明,异源O-抗原的表达降低了细菌的泳动能力和对多黏菌素B的敏感性,但并没有改变细菌的定殖能力和毒力。3疫苗株的免疫原性及交叉保护力评价分别缺失三株重组株的毒力基因crp,获得三株鼠伤寒沙门菌疫苗株SLT25（pCZ11）、SLT26（pCZ11）、SLT27（pCZ11）。分别在第一周和第七周对小鼠进行初次免疫和加强免疫,ELISA结果显示,在免疫后第七周,三个免疫组均产生了高水平的针对同源、异源LPS的血清IgG应答,其中SLT26（pCZ11）组产生的异源LPS抗体应答最为显著。血清补体杀菌实验证实,三个免疫组血清均能有效地杀伤鼠伤寒沙门菌和纽波特沙门菌,其中SLT26（pCZ11）组针对纽波特沙门菌的杀菌效果最显著。在鼠伤寒沙门菌攻毒后,三个免疫组组织器官中的细菌载量均显著降低,且三个疫苗株均提供100%的同源保护率。在纽波特沙门菌攻毒后,三个免疫组的细菌载量均显著降低,其中SLT26（pCZ11）、SLT27（pCZ11）组的细菌清除效果优于SLT25（pCZ11）组。与之对应,SLT25（pCZ11）疫苗株仅提供50%的异源保护率,SLT26（pCZ11）和SLT27（pCZ11）疫苗株能够提供100%的异源保护率。以上结果表明,本研究构建的SLT26（pCZ11）和SLT27（pCZ11）疫苗株可以用于预防鼠伤寒沙门菌和纽波特沙门菌,同时也表明,O-抗原有能力激发机体清除细菌,表明异源表达O-抗原是开发沙门菌二价疫苗的有效策略。