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目的抑郁症的发病机制十分复杂,随着针刺治疗在临床上逐渐受到人们的认可,关于针刺治疗抑郁症的机制研究也越来越多。本研究旨在通过观察针刺对慢性束缚应激抑郁模型大鼠海马和额叶皮层γ-氨基丁酸受体(GABAAR、GABABR)表达的影响,深入揭示针刺干预抑郁状态可能存在的特殊机制和作用途径,为针刺抗抑郁的机制研究作出一定补充,为针刺在临床治疗抑郁症提供实验依据。方法将24只Sprague-dawley大鼠采用随机数表法分为四组,每组6只。在实验前,每组大鼠适应性喂养一周。除空白组外,均通过慢性束缚应激结合孤养的方式建立抑郁模型。具体方法:将铁丝网两端用夹子固定住,并保证大鼠呼吸不受影响,于每天9am-3pm/d束缚应激6小时,束缚期间,断食断水,束缚结束后,将动物放回笼中,允许其自由摄食饮水,持续束缚28d。空白组(N):大鼠群养,6只/笼,9am-3pm/d。模型组(M):大鼠孤养,1只/笼,9am-3pm/d慢性束缚,断食断水6h,之后时间自由摄食饮水,持续28d。模型+针刺组(A):大鼠孤养,1只/笼,每天在束缚应激前1h针刺干预相当于人体的“百会”(GV20)、“印堂”(GV29)和双侧“三阴交”(SP6)穴,平刺进针,深度0.5-1cm,每次20min,每日一次。9am-3pm/d慢性束缚,断食断水6h,之后自由摄食饮水,持续28d。模型+氟西汀组(F):大鼠孤养,1只/笼,每天在束缚应激前接受氟西汀灌胃干预,氟西汀给药方法:于每天进行应激刺激前1h给予盐酸氟西汀分散片(1.8mg/kg)10ml/kg/d灌胃,每日一次。9am-3pm/d慢性束缚,断食断水6h,其余时间自由摄食饮水,持续28d。分别于造模前1天,造模后第14、28天称重,以造模前的体重为基线数据,计算体重增长值(后一时间点与前一时间点的体质量差值),来反映大鼠体质量变化和饮食状况。造模前,保证所有大鼠适应含糖饮水。造模后,分别在第7、14、21天的前23小时断食断水,然后同时给予每只大鼠事先定量好的两瓶水:一瓶纯水,一瓶1%蔗糖水。1h后取走两瓶水称重。计算大鼠的糖水偏爱指数(糖水偏爱指数=糖水消耗/总液体消耗× 100%),评价快感行为。在大鼠存活期满后,处死大鼠并快速取出海马、额叶皮层,运用蛋白质印迹法(Western Blot)检测分析海马和额叶皮层皮组织GABAAR和GABABR的蛋白相对表达含量。结果1.行为学结果显示:体重增长值:①与空白组相比较,模型组大鼠体重增长值明显下调(P<0.01);②与模型组相比较,针刺组大鼠体重增长值明显上调(P<0.01);③与模型组相比较,氟西汀组大鼠体重增长值明显上调(P<0.01);④与氟西汀组相比较,针刺组大鼠体重增长值无明显差异(P>0.05)。糖水偏爱指数:①与空白组相比较,模型组大鼠糖水偏爱指数明显下调(P<0.01);②与模型组相比较,针刺组糖水偏爱指数明显上调(P<0.01);③与模型组相比较,氟西汀组糖水偏爱指数明显上调(P<0.01);④与氟西汀组相比较,针刺组糖水偏爱指数无明显差异(P>0.05)。2.Western Bolt 结果显示:海马中GABAAR/GABABR相对表达量:①与空白组相比较,模型组大鼠海马中GABAAR和GABABR蛋白含量明显下调(P<0.01,P<0.01);②与模型组相比,氟西汀组大鼠海马中GABAAR和GABABR蛋白含量明显上调(P<0.05,P<0.05);③与模型组相比较,针刺组海马中GABAAR蛋白含量上调,海马中GABABR蛋白含量上调不明显,无统计学意义(P<0.05,P>0.05);④与氟西汀组相比较,针刺组大鼠海马中GABAAR蛋白含量无明显差异(P>0.05)。额叶皮层中GABAAR/GABABR相对表达量:①与空白组相比较,模型组大鼠额叶皮层中GABAAR和GABABR蛋白含量明显下调(P<0.01,P<0.01);②与模型组相比,氟西汀组大鼠海马额叶皮层中GABAAR和GABABR蛋白含量明显上调(P<0.01,P<0.05);③与模型组相比较,针刺组大鼠额叶皮层中GABAAR和GABABR蛋白含量明显上调(P<0.01,P<0.01);④与氟西汀组相比较,针刺组大鼠额叶皮层中GABAAR和GABABR蛋白含量无明显差异(P>0.05,P>0.05)。结论1.与空白组相比,模型组大鼠体重增长值及糖水偏好指数明显下调,说明大鼠胃肠功能减弱,快感缺失,这与抑郁症患者临床表现较为相似,说明抑郁模型建造成功。2.与空白组相比,模型组大鼠海马-额叶皮层GABAAR/GABABR蛋白含量下调,,说明抑郁症的发病与海马-额叶皮层GABAAR/GABABR蛋白含量有关。3.与模型组相比,针刺组大鼠体重增长值及糖水偏好指数均上调,说明针刺能够改善胃肠功能和快感缺失的抑郁状态。4.与模型组相比,针刺组大鼠海马GABAAR和额叶皮层GABAAR/GABABR蛋白含量上调,说明针刺的抗抑郁作用可能是通过上调海马中GABAAR和额叶皮层GABAAR/GABABR的蛋白含量来实现的。5.与模型组相比,针刺组大鼠海马GABABR蛋白含量上调不明显,这可能与GABABR在脑内的分布以大脑皮层为主而海马内分布相对较少有关。6.与氟西汀组相比,针刺组大鼠海马GABAAR和额叶皮层GABAAR/GABABR蛋白含量无显著性差异,说明针刺与氟西汀抗抑郁作用具有趋同性。