背景:虽然高效抗逆转录病毒治疗（HAART）在控制HIV-1感染方面卓有成效,但存在服药依从性差、耐药等诸多问题。近年来,HIV-1的抗体治疗成为热点,抗HIV-1广谱中和抗体（b NAbs）通过与HIV-1包膜糖蛋白gp120特异性结合可以中和HIV-1、预防HIV-1感染,在艾滋病功能性治愈乃至根治上极有可能发挥重要作用,带来颠覆性的突破。而我国HIV-1感染情况复杂多变,目前,尚无针对国内HIV-1流行毒株的快速、可靠的b NAbs筛选方法及亲和力和中和活性探究。本研究旨在通过分子对接的方法,快速筛选出可能与国内HIV-1优势流行株具有较好亲和力的b NAbs,并进一步检测其亲和力及中和能力。期望为针对中国HIV-1亚型的抗体治疗和CAR-T治疗提供重要指南,并作为HIV-1功能性治愈免疫治疗策略的设计参考。方法:利用分子对接,筛选出可能与中国流行的HIV-1gp120具有高亲和力的b NAbs。构建、表达、纯化了四种在中国流行的HIV-1亚型gp120,同时,在优化条件下,将b NAbs克隆并瞬时表达于293F细胞中并进行纯化。利用BLI测定两者亲和力大小;并进一步构建、包装了HIV-1假病毒,测定b NAbs中和活性。结果:本研究成功从已发现的b NAbs中筛选出了对国内流行HIV-1亚型具有高亲和力的靶向gp120的b NAbs:VRC01抗体、N6抗体、3BNC117抗体;构建了3种抗体的表达质粒及4种gp120表达质粒,并成功优化了抗体表达,实现抗体产量的最大化,获得纯度＞95%的抗体和gp120蛋白,并实验验证了这3种抗体对国内流行HIV-1亚型具有较高的亲和力和中和活性。结论:综上所述,本研究以分子对接的方法筛选出了对国内HIV-1具有较好对接得分的b NAbs,并通过实验评价其亲和力及中和活性。结果显示筛选出的3种b NAbs对4种国内HIV-1流行毒株均具有较好的亲和力和广谱中和活性,其中,N6的中和效果最好。这一发现为课题组后续进行被动免疫治疗和CAR-T治疗时对b NAbs的选择提供了参考,也为HIV-1疫苗的研发提供了新思路。利用分子对接来筛选b NAbs还为抗体药研发提供了新方法。